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利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210339467.X, 申请日期: 2014-03-26, 公开日期: 2014-03-26
单体锋; 逄少军; 高素芹
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一种利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法  2）将上述孤雌生殖成熟的孢子体的孢子叶置于海水中释放得到游孢子  3）上述附着游孢子的苗帘在光强50?80μmol?photons?m?2s?1  4）将雄配子体与附着在苗帘上的雌配子在50?80μmol?photonsm?2s?1光强下完成发育和受精过程  待幼孢子体达到200?500μm左右  其特征在于：1）将雌性配子体进行诱导培养至幼孢子体达到1mm以上转入充气培养条件下  待释放得到游孢子的海水颜色为黄褐色后  水温18－22℃  转到海上栽培  完成孤雌生殖孢子体的生活史  将游孢子附着在苗帘上  光周期12h白天：12h黑夜条件下培养13?15d  即实现裙带菜的培育。  形成孤雌生殖成熟的孢子体  而后将苗帘放入新鲜海水中  待萌发的游孢子全部发育成雌配子体并充分生长后  降低光强至2?10μmol?photons?m?2s?1  延缓配子体的发育使其度过高水温的夏季  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
刘清华; 李军; 徐世宏; 韩龙江
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一种大型藻类的微球体构建培养方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210030881.2, 申请日期: 2012-07-11, 公开日期: 2012-07-11
王金霞; 董逸; 周百成
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一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液  收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  其特征在于：1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  NaCl浓度分别为0  滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl  滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱  0.1  10～50mM  采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离  0.2  pH7.0PBS缓冲液以0.2～1.0mLmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱液在低温下用3～5K的超滤管进行浓缩  0.3和2M  收集洗脱体积处于60～80mL的洗脱液  待用  而后在2～6℃下用3～5K的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种羟丙基壳聚糖/碳纳米管修饰的电化学传感器及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261812.3, 申请日期: 2012-03-14, 公开日期: 2012-03-14
庞雪辉; 张洁; 隋卫平; 魏琴; 谭福能; 解建东; 侯保荣
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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  2)将上述步骤1)上清液于2～6℃下用缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离  其特征在于：1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离  依次采用pH7.8  破碎后2～6℃离心  收集上清液  分离时采用含有0.1～0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1～0.3MNaCl的pH7.4  浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8  收集上清液  待用  浓度10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  待用  低温离心  流速为0.2～0.5mLmin?1  收集上清液  收集约25～40min洗脱液  待用  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种以浒苔为原料生产沼气的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810157676.6, 申请日期: 2009-04-29, 公开日期: 2009-04-29
冯大伟; 秦松; 李富超; 姜鹏; 陈华新; 杨庆利
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三倍体单体牡蛎规模化培育方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610046697.1, 申请日期: 2007-11-28, 公开日期: 2007-11-28
作者:  相建海;  刘保忠
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权利要求书1.三倍体单体牡蛎规模化培育方法  2)获卵和三倍体产生：利用四倍体与二倍体母本杂交生产100％的三倍体  3)幼体培育：受精卵孵出后  4)无附着变态：首先滤出健康的眼点幼虫  实现三倍体的单体培育  5)上升流培养：稚贝经过变态附着后进入上升流培养系统  6)下降流培养：培养8-12天  7)室外暂养：稚贝培养到5mm左右后  8)潮间带筏式养殖：养殖期8-10个月  其特征在于：1)亲贝培育：包括二倍体和四倍体亲贝的培育  幼虫经18-20天即出现眼点和足  然后可利用肾上腺素处理  幼虫变态后  培养15±2天  稚贝生长到4-6mm  转移到室外暂养池  个体生长到7～8cm即可收获。  生长到眼点期幼虫  贝壳粉加下降流设备实现无附着变态  生产长度达到0.25-0.35mm的稚贝  稚贝生长到1.95-2.05mm  在自然环境条件下培育27-33天  稚贝生长到1.3-1.7cm  后进行三倍体单体牡蛎养殖  
一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510136709.5, 申请日期: 2007-07-04, 公开日期: 2007-07-04
许建和; 尤锋; 张培军; 吴雄飞; 徐永立; 蒋宏雷
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权利要求书1  ②精液稀释：采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液  其中：按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为NaCl 0.60～0.80％  pH  稀释液预冷到0～5℃  ③精子遗传物质失活：紫外光源预热5～10min后  其中：紫外光源的照射剂量为1800～6000erg/mm2。  一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法  稀释倍数为20～100倍  KCl 0.03～0.05％  7.0～7.3  将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下  包括：精液保存  然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0～5℃的培养皿中  CaCl2  照射1.5～5min  精液稀释  其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1～0.3cm  0.01～0.03％  使得大黄鱼遗传物质失活  精子遗传物质失活  葡萄糖0.05～0.10％  其特征在于：①精液保存：将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2～4℃低温条件下备用  
一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
朱香萍; 尤锋; 张培军; 孙威; 徐永立
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权利要求书1  ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵  ③在常温下用浓度百分比为1-2％的Triton-100对样品进行打孔处理  其中：磷酸盐缓冲液成分为128mM NaCl  ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色  抚育一抗过夜  清洗液为含有155mM NaCl  抗体稀释液含有浓度百分比为10％的山羊血清和5％的二甲亚砜的Tris盐酸缓冲液  ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。  一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法  并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来  再在含有80-200mM NaBH4的磷酸盐缓冲液中  2mM KCl  其中：抚育抗体前非特异结合位点不封闭  抚育二抗为避光2-4小时  10mM Tris-Cl  其特征在于包括步骤如下：①采用改进的哌嗪-N  室温下抚育6-16小时  8mM NaH2PO4  pH为7.2-7.4的Tris盐酸缓冲液  N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定  2mMKH2PO4  及诺纳德P-40  受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时  pH 7.2-7.4  其中诺纳德P-40占Tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2％  磷酸吐温缓冲溶液清洗  然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存  待用  

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