一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法

	一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法
	于华华; 邢荣娥; 李鹏程
	2011-09-07
专利号	CN201110027667.7
专利类型	发明
关键词	一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法 2)将上述步骤1)上清液于2～6℃下用缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离其特征在于：1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离依次采用pH7.8 破碎后2～6℃离心收集上清液分离时采用含有0.1～0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1～0.3MNaCl的pH7.4 浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8 收集上清液待用浓度10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱待用低温离心流速为0.2～0.5mLmin?1 收集上清液收集约25～40min洗脱液待用即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
权利人	中国科学院海洋研究所.
中文摘要	本发明涉及海洋生物技术领域，具体的说是一种分离纯化霞水母致死毒素蛋白的方法。其分离方法如下：霞水母刺丝囊细胞经超声破碎提取得到水母粗毒素，透析除盐后先后依次经过亲和色谱层析分离和阴离子交换色谱技术分离纯化，最终得到一种具有致死活性水母毒素蛋白，测得其分子量为30kDa，并且测定其对斑马鱼的半致死量LD50为0.56μg毒素蛋白/g.鱼。本发明具快速、简便的特点，为获得霞水母致死毒素蛋白提供了重要的方法指导。
公开日期	2011-09-07
申请日期	2011-01-21
语种	中文
专利申请号	CN201110027667.7
内容类型	专利
源URL	[http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17118]
专题	海洋研究所_海洋生物技术研发中心海洋研究所_海洋环境工程技术研究发展中心
推荐引用方式 GB/T 7714	于华华,邢荣娥,李鹏程. 一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法. CN201110027667.7. 2011-09-07.