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一种利用碳基纳米材料提升真菌群落检测准确性的方法
专利
专利号: CN108517369A, 申请日期: 2018-09-11, 公开日期: 2018-09-11
作者:
邓晔
;
刘洋荧
;
厉舒祯
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提交时间:2019/11/27
1.一种利用碳基纳米材料提升真菌群落检测准确性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)采集真菌群落样本,提取真菌群落样本的ITS#rRNA基因,并根据真菌群落样本的ITS#rRNA基因设计并合成上下游引物
(2)将碳基纳米材料与PCR扩增反应体系混合均匀,并利用上下游引物扩增真菌群落样本的ITS#rRNA基因
(3)PCR产物分离纯化后,构建文库后进行高通量测序,对测序数据进行处理后,分析嵌合体所占的比例并去除嵌合体序列,然后对非嵌合体序列进行比对,确定错配序列所占的比例。
一种利用碳基纳米材料提升细菌群落多样性检测准确性的方法
专利
专利号: CN108060219A, 申请日期: 2018-05-22, 公开日期: 2018-05-22
作者:
邓晔
;
厉舒帧
;
宋茂勇
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浏览/下载:4/0
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提交时间:2019/11/27
一种利用碳基纳米材料提升细菌群落多样性检测准确性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)采集细菌群落样本,提取细菌群落样本的16SrRNA基因,并根据细菌群落样本的16SrRNA基因设计并合成上下游引物
(2)将碳基纳米材料与PCR扩增反应体系混合均匀,并利用上下游引物扩增细菌群落样本的16SrRNA基因
(3)PCR产物分离纯化后,构建文库后进行高通量测序,对测序数据进行处理后,分析嵌合体数量并去除嵌合体序列,然后对非嵌合体序列进行比对,确定错配序列的数量。
一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310309620.9, 申请日期: 2013-11-27, 公开日期: 2013-11-27
作者:
邢荣娥
;
于华华
;
李鹏程
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浏览/下载:32/0
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提交时间:2014/08/04
一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法
b)将上述收集的上清液加入活性炭进行脱色处理
c)调节上述收集清液的pH值
d)将上述清液减压浓缩
其特征在于:a)以扇贝为原料
过滤收集清液
而后去除清液中酸性沉淀蛋白质和碱性沉淀蛋白质
所得浓缩液经纯化处理即为天然牛磺酸。
烘干后用高速粉碎机粉碎
待用
过滤收集清液
粉碎后粉末于蒸馏水中55℃‑80℃
待用
恒温水浴保温1‑3h
过滤收集清液
待用
一种藻蓝蛋白提取物的制备和应用
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010214387.2, 申请日期: 2010-11-24, 公开日期: 2010-11-24
陈英杰
;
秦松
;
李富超
;
郭雪洁
;
刘少芳
;
董晓弟
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浏览/下载:34/0
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提交时间:2014/08/04
一种藻蓝蛋白提取物
用质量分数为50?60%的硫酸铵沉淀粗提液得到蛋白质粗提物
而后采用双水相萃取纯化蛋白质粗提物
其特征为:将螺旋藻粉在?20℃~4℃下通过反复冻融法破碎螺旋藻细胞壁得到粗提物
并用超渗除盐
即得藻蓝蛋白提取物溶液。
一种分离纯化组蛋白H4的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047932.7, 申请日期: 2008-04-02, 公开日期: 2008-04-02
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
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浏览/下载:43/0
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提交时间:2014/08/04
1
而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min
(2)分离纯化:①加样前样品预处理:将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中
②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中
③洗脱:采用含有NaCl的缓冲液
一种分离纯化组蛋白H4的方法
取上清液备用
每隔8-12min搅拌一次
用3-5倍床体积的缓冲液淋洗
以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱
其特征在于包括以下步骤:(1)提取样品:将50g-150g的海蜇样品破碎
共搅拌2-6次
收集组分。
然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液
而后在相对离心力为573-1467g下
放入2℃-6℃下
离心5-10min
浸泡0.5-48hh
弃去上清液
一种海洋共生体的暂养、共生生物分离纯化的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510046777.2, 申请日期: 2007-01-03, 公开日期: 2007-01-03
王广策
;
朱葆华
;
尤丽莉
;
闫萧駰
;
曾呈奎
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浏览/下载:31/0
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提交时间:2014/08/04
权利要求书1.一种海洋共生体的暂养
分离纯化步骤如下:用过滤海水洗净共生体的表面
然后过滤
沉淀用提取缓冲液重悬浮
共生生物分离纯化的方法
取共生体组织放入匀浆器中
滤液离心
重复匀浆
其特征在于:暂养条件如下:水温23-28℃
然后加入分离提取缓冲液和青霉素
过滤离心的步骤
海水比重1.000-1.121
匀浆
每次重悬浮的溶液均进行镜检
盐度26-31‰
直到提取的共生生物纯净为止。
光照强度100-250μmoLm-2s-1
光照周期12小时光照
12小时黑暗
海带中L-褐藻糖的制备方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410075712.6, 申请日期: 2005-09-21, 公开日期: 2005-09-21
徐祖洪
;
赵增芹
;
张全斌
;
牛锡珍
;
张虹
;
李智恩
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浏览/下载:28/0
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提交时间:2014/08/04
1
再按如下精制步骤:1)取一定量的提纯褐藻多糖硫酸酯加水再加酸进行水解反应
2)水解液冷却后
3)将2)步所得的滤液通过732强酸阳离子树脂柱
4)将适量的IRA-67弱碱阴离子树脂加入到3)步所得的阳树脂流份中
再用该分离液0.05-0.1体积倍的蒸馏水洗涤该阴离子树脂
收集合并分离液和洗涤液为阴树脂流份
5)将4)步所得的阴树脂流份真空浓缩至原体积的1/100
将该滤液再真空浓缩至原体积的1/150的糖浆状
6)将5)步所得的糖浆
该滤液再真空浓缩至原体积的1/100糖浆状
7)将6)步所得的糖浆
8)将7)步所得到的糖浆转移至称量瓶中
9)将8)步所得的滤液
10)由于9)步所得的粗制L-褐藻糖尚含有18.9-21.7%的半乳糖
在5℃溶解5~8小时
11)将10)步所得的混合液过滤
所得L-褐藻糖晶体的产率为16.2%~17.0%。
海带中L-褐藻糖的制备方法
按该多糖与水
用碳酸钡中和至pH7±0.2
收集流出液
不间断搅拌
再按该浓缩液与95%的乙醇的体积比1∶10-20加入95%乙醇
溶于50-100体积倍的无水乙醇中
溶于50-100体积倍的蒸馏水中
加入该糖浆体积的5.0-10.0倍的无水乙醇溶解该糖浆
按重量投种比0.5‰投入标准L-褐藻糖晶种
需将粗制褐藻糖晶体混合物中加入50~60倍体积的甲醇-丙酮混合溶液
不断搅动
取滤液
它是一种6-脱氧己糖类单糖的制备方法
浓酸的重量比例1∶40-80∶1.96--19.6加水再加酸
过滤
去除K
观察pH值至终点
过滤
过滤
并加入该蒸馏水重量的0.04-0.07倍的活性炭
然后加入该糖浆体积的2.0-4.0倍的丙酮
置于5℃的冰箱中
其中甲醇-丙酮体积比为9∶5
使L-褐藻糖较多地溶出
在55℃~60℃真空浓缩至原体积的1/90的糖浆状
其特征在于:所述的制备方法是以海带为原料
轻沸回流水解时间为3-4小时
去除沉淀
Na.Ca
分离该阴离子树脂去除糖醛酸及硫酸基
除去沉淀
除去沉淀
煮沸30分钟
过滤
3-7天后结晶
12)将11)步所得的糖浆加入到5.0-10.0倍体积的无水乙醇中溶解
经水提醇沉法提取并纯化得到提纯的褐藻多糖硫酸酯
Mg等无机盐
不停搅拌
弃去滤出物
过滤
再按重量投种比5‰投入标准L-褐藻糖晶种
然后用该滤液0.5-1体积倍的蒸馏水洗涤
然后趁热硅藻土过滤
滤液仍置于冰箱中
置于5℃的冰箱中3~7天后
收集合并流出液和洗涤液为阳树脂流份
滤液再真空浓缩至原体积的1/100的糖浆状
以待进一步结晶
过滤
取滤出结晶物用无水乙醇洗涤2次
真空干燥
再真空干燥
即得纯度高的L-褐藻糖晶体
即得粗制的L-褐藻糖晶体混合物
龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
段德麟
;
李文红
;
胡自民
收藏
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浏览/下载:48/0
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提交时间:2014/08/04
1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
提取缓冲液的组成为:100mmolL-1Tris.HCl
(2)PCR扩增:龙须菜ITS区扩增的特异引物P1
P2:5’GGGATCCATATGCTTAAGTTCAGCGGGT3’
利用该引物对步骤(1)提取的DNA为模板
(3)PCR产物纯化
(4)DNA序列测定:纯化后的DNA进行序列测定
(5)DNA序列数据分析:待分析的rDNAITS区的序列一经测定
建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的RAPD和ISSR特异指纹图谱
2)RAPD和ISSR引物的合成
3)根据扩增条带的多态性
其特征在于:龙须菜的rDNAITS全序列的获取
pH8.0
P2的序列分别为:P1:5’GGGATCCGTTTCCGTAGGTGAACCTGC3’
位于26S上
对总DNA进行PCR扩增反应
确立rDNAITS区
用对位排列软件ClustalW进行对位排列
步骤如下:1)总DNA提取
从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物
构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的RAPD和ISSR特异指纹图谱。
步骤如下:(1)总DNA提取:取新鲜健康的藻体材料
50-100mmolL-1EDTA
位于18S上
包括ITS1和5.8S区的全序列
并辅以人工校对
用无菌水处理后
0.2-0.5MNaCl
用系统进化分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异
在液氮种研磨成粉末
5%β-巯基乙醇
提取总DNA
0.2%PVP-40
1.0-2.5%SDS
提取所用的KAc浓度为4.0-5.0M
pH值范围在5.2-7.5
1,2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂的制备方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN01128229.0, 申请日期: 2003-04-09, 公开日期: 2003-04-09
范晓
;
韩丽君
;
李宪璀
;
娄清香
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浏览/下载:21/0
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提交时间:2014/08/04
1.一种1
2)二乙基氨基乙基纤维素的预处理与装柱二乙基氨基乙基纤维素经酸碱预处理后
3)1
4)1
(2)按每克粗品50g~100g硅胶的比例
2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂的制备方法
用甲醇
2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品的制备取所述海藻总脂溶于3∶2至1∶1体积比的氯仿-甲醇混合溶剂
2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品的纯化(1)将所述1
称取100~200目硅胶
其特征在于按如下步骤操作:1)海藻总脂的提取用有机溶剂浸提粉碎的海藻
氯仿清洗
加到层析柱柱床表面
2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品溶于用1∶1体积比配制的氯仿-甲醇中
在100~120℃下活化1.5~3小时
提取液中加入0.3~1%的氯化钾溶液分层
用乙酸处理
继续用所述混合溶剂洗脱掉杂质
加入0.3~1%
KCl
溶液
冷却后悬浮在冷丙酮中装柱
将有机相减压蒸干
悬浮在甲醇中装柱
再用体积比为12∶8∶(0.5~1.5)的
CHCl
3
∶
CH
3
OH
∶
NH
3
·H
2
O
混合溶剂洗脱
其最后氯仿-甲醇-水的比例为1∶1∶0.5~1
将所述纯化后
得到海藻总脂
得到1
离心分层
2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品
弃掉水相
除去乙酸铵
一种南极磷虾中吡咯并[1,2??a]吡嗪??1,4??二酮,六氢??3??(2??甲基丙基)的提取纯化及检测方法
专利
公开日期: 2017
作者:
王翩翩[1]
;
刘代成[1]
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提交时间:2020/01/04
检测
蒸发
南极磷虾
氯仿层
提取纯化
乙醚浸膏
吡咯
甲醇
甲基丙基
酸水层
吡嗪
公开
氢氧化钠
萃取
Pro
Cyclo
Leu
硫酸
过滤
浓缩
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