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水煮加热虾肉蛋白变化研究
期刊论文
2015, 卷号: 36, 期号: 15, 页码: 66
作者:
李晓龙[1]
;
刘书成[1]
;
解万翠[1]
;
吉宏武[1]
;
毛伟杰[1]
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提交时间:2019/12/26
水煮
虾肉
蛋白变化
总巯基
龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
段德麟
;
李文红
;
胡自民
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浏览/下载:48/0
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提交时间:2014/08/04
1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法
提取缓冲液的组成为:100mmolL-1Tris.HCl
(2)PCR扩增:龙须菜ITS区扩增的特异引物P1
P2:5’GGGATCCATATGCTTAAGTTCAGCGGGT3’
利用该引物对步骤(1)提取的DNA为模板
(3)PCR产物纯化
(4)DNA序列测定:纯化后的DNA进行序列测定
(5)DNA序列数据分析:待分析的rDNAITS区的序列一经测定
建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的RAPD和ISSR特异指纹图谱
2)RAPD和ISSR引物的合成
3)根据扩增条带的多态性
其特征在于:龙须菜的rDNAITS全序列的获取
pH8.0
P2的序列分别为:P1:5’GGGATCCGTTTCCGTAGGTGAACCTGC3’
位于26S上
对总DNA进行PCR扩增反应
确立rDNAITS区
用对位排列软件ClustalW进行对位排列
步骤如下:1)总DNA提取
从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物
构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的RAPD和ISSR特异指纹图谱。
步骤如下:(1)总DNA提取:取新鲜健康的藻体材料
50-100mmolL-1EDTA
位于18S上
包括ITS1和5.8S区的全序列
并辅以人工校对
用无菌水处理后
0.2-0.5MNaCl
用系统进化分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异
在液氮种研磨成粉末
5%β-巯基乙醇
提取总DNA
0.2%PVP-40
1.0-2.5%SDS
提取所用的KAc浓度为4.0-5.0M
pH值范围在5.2-7.5
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