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科研机构
海洋研究所 [1]
内容类型
专利 [1]
发表日期
2011 [1]
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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:
于华华
;
邢荣娥
;
李鹏程
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浏览/下载:17/0
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法
2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离
其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离
依次采用pH7.8
破碎后2~6℃离心
收集上清液
分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8
收集上清液
待用
浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
待用
低温离心
流速为0.2~0.5mLmin?1
收集上清液
收集约25~40min洗脱液
待用
即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
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