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一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种乙酰化壳三糖的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210259734.2, 申请日期: 2012-12-19, 公开日期: 2012-12-19
作者:  李鹏程;  邢荣娥;  于华华
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一种单一聚合度壳寡糖制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210146042.7, 申请日期: 2012-09-05, 公开日期: 2012-09-05
作者:  邢荣娥;  李鹏程;  于华华
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛
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一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
朱香萍; 尤锋; 张培军; 孙威; 徐永立
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权利要求书1  ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵  ③在常温下用浓度百分比为1-2%的Triton-100对样品进行打孔处理  其中:磷酸盐缓冲液成分为128mM NaCl  ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色  抚育一抗过夜  清洗液为含有155mM NaCl  抗体稀释液含有浓度百分比为10%的山羊血清和5%的二甲亚砜的Tris盐酸缓冲液  ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。  一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法  并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来  再在含有80-200mM NaBH4的磷酸盐缓冲液中  2mM KCl  其中:抚育抗体前非特异结合位点不封闭  抚育二抗为避光2-4小时  10mM Tris-Cl  其特征在于包括步骤如下:①采用改进的哌嗪-N  室温下抚育6-16小时  8mM NaH2PO4  pH为7.2-7.4的Tris盐酸缓冲液  N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定  2mMKH2PO4  及诺纳德P-40  受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时  pH 7.2-7.4  其中诺纳德P-40占Tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2%  磷酸吐温缓冲溶液清洗  然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存  待用  


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