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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
韩丽君; 袁毅; 郭书举; 曲桂艳; 刘旭
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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法  酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液  2)将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5  将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎  3)将上述合并液  4)将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解  其特征在于:1)将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h  搅拌浸泡4‑7h  在经过滤或高速离心  破碎后进行离心分离收集上清液B  过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分  溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱  稀酸浸泡液待用  收集水浸泡液  收集过滤液A  而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积(V/W)  收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得  保留上层漂浮物  将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用  浓缩液进行醇沉淀  即得到原藻重量1.5‑2.3%的岩藻聚糖硫酸酯。  沉淀物干燥  即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品  
一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310140315.1, 申请日期: 2013-08-07, 公开日期: 2013-08-07
作者:  李鹏程;  邢荣娥;  于华华
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一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液  收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  NaCl浓度分别为0  滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl  滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱  0.1  10~50mM  采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离  0.2  pH7.0PBS缓冲液以0.2~1.0mLmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱液在低温下用3~5K的超滤管进行浓缩  0.3和2M  收集洗脱体积处于60~80mL的洗脱液  待用  而后在2~6℃下用3~5K的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
海带中L-褐藻糖的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410075712.6, 申请日期: 2005-09-21, 公开日期: 2005-09-21
徐祖洪; 赵增芹; 张全斌; 牛锡珍; 张虹; 李智恩
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1  再按如下精制步骤:1)取一定量的提纯褐藻多糖硫酸酯加水再加酸进行水解反应  2)水解液冷却后  3)将2)步所得的滤液通过732强酸阳离子树脂柱  4)将适量的IRA-67弱碱阴离子树脂加入到3)步所得的阳树脂流份中  再用该分离液0.05-0.1体积倍的蒸馏水洗涤该阴离子树脂  收集合并分离液和洗涤液为阴树脂流份  5)将4)步所得的阴树脂流份真空浓缩至原体积的1/100  将该滤液再真空浓缩至原体积的1/150的糖浆状  6)将5)步所得的糖浆  该滤液再真空浓缩至原体积的1/100糖浆状  7)将6)步所得的糖浆  8)将7)步所得到的糖浆转移至称量瓶中  9)将8)步所得的滤液  10)由于9)步所得的粗制L-褐藻糖尚含有18.9-21.7%的半乳糖  在5℃溶解5~8小时  11)将10)步所得的混合液过滤  所得L-褐藻糖晶体的产率为16.2%~17.0%。  海带中L-褐藻糖的制备方法  按该多糖与水  用碳酸钡中和至pH7±0.2  收集流出液  不间断搅拌  再按该浓缩液与95%的乙醇的体积比1∶10-20加入95%乙醇  溶于50-100体积倍的无水乙醇中  溶于50-100体积倍的蒸馏水中  加入该糖浆体积的5.0-10.0倍的无水乙醇溶解该糖浆  按重量投种比0.5‰投入标准L-褐藻糖晶种  需将粗制褐藻糖晶体混合物中加入50~60倍体积的甲醇-丙酮混合溶液  不断搅动  取滤液  它是一种6-脱氧己糖类单糖的制备方法  浓酸的重量比例1∶40-80∶1.96--19.6加水再加酸  过滤  去除K  观察pH值至终点  过滤  过滤  并加入该蒸馏水重量的0.04-0.07倍的活性炭  然后加入该糖浆体积的2.0-4.0倍的丙酮  置于5℃的冰箱中  其中甲醇-丙酮体积比为9∶5  使L-褐藻糖较多地溶出  在55℃~60℃真空浓缩至原体积的1/90的糖浆状  其特征在于:所述的制备方法是以海带为原料  轻沸回流水解时间为3-4小时  去除沉淀  Na.Ca  分离该阴离子树脂去除糖醛酸及硫酸基  除去沉淀  除去沉淀  煮沸30分钟  过滤  3-7天后结晶  12)将11)步所得的糖浆加入到5.0-10.0倍体积的无水乙醇中溶解  经水提醇沉法提取并纯化得到提纯的褐藻多糖硫酸酯  Mg等无机盐  不停搅拌  弃去滤出物  过滤  再按重量投种比5‰投入标准L-褐藻糖晶种  然后用该滤液0.5-1体积倍的蒸馏水洗涤  然后趁热硅藻土过滤  滤液仍置于冰箱中  置于5℃的冰箱中3~7天后  收集合并流出液和洗涤液为阳树脂流份  滤液再真空浓缩至原体积的1/100的糖浆状  以待进一步结晶  过滤  取滤出结晶物用无水乙醇洗涤2次  真空干燥  再真空干燥  即得纯度高的L-褐藻糖晶体  即得粗制的L-褐藻糖晶体混合物  


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