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海洋研究所 [2]
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专利 [2]
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2012 [1]
2010 [1]
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专题:海洋研究所
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一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
作者:
刘保忠
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浏览/下载:20/0
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提交时间:2014/08/04
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件Primer?Premier?5.0设计引物
GC含量为40%?60%
退火温度为45?65℃
预期PCR产物长度为100?400bp
3)引物优化:根据不同引物的Tm值进行温度梯度优化
4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)衡量
包括微卫星位点来源
引物设计条件为:引物长度为19?25mer
在Tm值上下各10℃
根据上述优化获得的Ta值
引物设计
温度梯度优化扩增得到的PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?EB染色系统进行检测
选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)进而衡量多态性信息
引物优化和微卫星标记家系鉴定体系
选取杂带较少
根据PIC值
其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组DNA利用提取的DNA
特异性产物亮度较高的PCR反应对应的温度为该引物的最佳退火温度Ta
PIC小于0.25的标记
采用限制性内切酶法获得文蛤基因组DNA片段
筛选得到重复性好
并构建微卫星磁珠富集文库
稳定性好
检测阳性克隆
PIC值大于0.25的位点
经测序得到含有微卫星重复的DNA序列
作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系
用于文蛤的家系区分与个体识别。
一种三疣梭子蟹抗病品系的构建方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810138161.1, 申请日期: 2010-01-06, 公开日期: 2010-01-06
崔朝霞
;
李喜莲
;
刘媛
;
王鸿霞
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提交时间:2014/08/04
1.一种三疣梭子蟹抗病品系的构建方法
首先将基础群体行群体选育所得群体与家系选育的补充材料进行家系选育
其特征在于:以选育材料的线粒体控制区序列的信息作为分子标记
而后将家系选育所得抗病性状稳定的群体之间进行家系间杂交组合
根据分子标记得到遗传变异丰富的群体作为群体选育的基础群体
所得抗病性状稳定的家系即为抗病品系
同时得到以遗传上相互独立的群体作为家系选育的补充材料
其中每一步骤选育材料均为经感染源浸泡感染后半致死浓度存活的个体。
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