| 题名 | 荧光假单胞菌三个TonB依赖型受体的研究 |
| 作者 | 张书仁 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2014-05 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 孙黎 |
| 关键词 | 荧光假单胞菌 TonB依赖的受体 铁 侵染 疫苗 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 中文摘要 | 鱼类的病原菌荧光假单胞菌是一种革兰氏阴性菌，其在水产上可以引起多种养殖鱼类的疾病，但是由于目前缺乏对于荧光假单胞菌的研究，对其致病机理还知之甚少。在本研究中，我们从鱼类病原菌荧光假单胞菌TSS菌株中克隆得到了三个TonB依赖型的外膜受体基因（tdr1，tdr2和tdr3），通过序列分析发现这三个受体都具有TonB依赖型的外膜受体家族的典型结构。荧光定量PCR对于三个基因的表达研究发现与正常培养条件相比在缺铁的培养条件下细菌的tdr1, tdr2和 tdr3三个基因的表达都表现出明显的上调。我们分别将三个基因通过插入失活获得三个突变株（命名为TSSTdr1、TSSTdr2和TSSTdr3），生长曲线实验发现与野生株相比三个基因失活的突变株的生长能力有不同程度的降低。在以大菱鲆为模型的活体侵染实验中发现与野生株相比三个突变株的体内侵染复制能力都有明显的降低，而且在致死能力的检测中TSSTdr1和TSSTdr3都表现出了显著降低的致死率。我们又把三种受体进行体外重组表达并用作亚单位疫苗，研究发现对于致死剂量的TSS侵染三种纯化的蛋白都都对大菱鲆表现出了明显的保护效应，同时在免疫后的鱼体也能够检测到特异抗体的存在。当用获得的抗体和野生TSS细菌孵育后可以明显减弱细菌对于鱼细胞系的侵染。我们的研究结果表明这三个基因跟细菌的铁调控有关，而且跟细菌的侵染有一定相关，当其用作为亚单位疫苗时能够对鱼体起到一定的免疫保护效应。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2014-08-11 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/18049]  |
| 专题 | 海洋研究所_实验海洋生物学重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 张书仁. 荧光假单胞菌三个TonB依赖型受体的研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2014. |
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