马铃薯α-淀粉酶在毕赤酵母中的表达、纯化及其酶学性质的研究

doi:10.13523/j.cb.20140909

	马铃薯α-淀粉酶在毕赤酵母中的表达、纯化及其酶学性质的研究
	王永刚 ; 马燕林 ; 马建忠 ; 马雪青 ; 任海伟
刊名	中国生物工程杂志
	2014-09-15
期号	2014年09期页码:56-62
关键词	α-淀粉酶马铃薯毕赤酵母表达与纯化酶学性质
ISSN号	ISSN：1671-8135
DOI	10.13523/j.cb.20140909
英文摘要	采用RT-PCR法扩增马铃薯夏波蒂的α-淀粉酶成熟肽基因,将其亚克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9k上,SacII线性化重组表达载体,电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,构建重组酵母GS115/pPIC9k-amy,利用锥虫蓝法筛选获得高活性转化子（GSamyA5）,以终浓度为0.5%甲醇诱导该重组菌表达α-淀粉酶,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化,并对其酶学性质进行研究。结果表明:该酶的最适反应温度为45℃,4050℃酶活较稳定,保温50 min,残留相对活力达92.6%;最适反应pH值为6.0,并在pH 6.07.0范围内酶活保持稳定。Ca2+、K+可促进酶反应,以Ca2+影响为最,相对酶活力提高到125%;Cu2+,Fe2+,Fe2+,Zn2+对该酶有显著抑制作用;Mn2+,Mg2+对酶有微弱抑制作用,L... 更多
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语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://119.78.100.223/handle/2XXMBERH/8338]
专题	生命科学与工程学院
作者单位	1.兰州理工大学生命科学与工程学院 2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点试验室国家口蹄疫参考试验室
推荐引用方式 GB/T 7714	王永刚,马燕林,马建忠,等. 马铃薯α-淀粉酶在毕赤酵母中的表达、纯化及其酶学性质的研究[J]. 中国生物工程杂志,2014(2014年09期):56-62.
APA	王永刚,马燕林,马建忠,马雪青,&任海伟.(2014).马铃薯α-淀粉酶在毕赤酵母中的表达、纯化及其酶学性质的研究.中国生物工程杂志(2014年09期),56-62.
MLA	王永刚,et al."马铃薯α-淀粉酶在毕赤酵母中的表达、纯化及其酶学性质的研究".中国生物工程杂志 .2014年09期(2014):56-62.