| 题名 | 六种中药材内生真菌的分离纯化及其发酵产物活性研究 |
| 作者 | 王帆 |
| 答辩日期 | 2016 |
| 导师 | 杨明俊 |
| 关键词 | 中药材 内生真菌 发酵粗提物 生物活性 抑菌机理 |
| 学位名称 | 硕士 |
| 英文摘要 | 内生真菌以其种群多样性和发酵产物活性物质多样性,越来越受到研究者的青睐。本课题以6种传统中药材(白毛蛇、毛姜、三叶青、泽泻、木香、茯苓)为研究对象,应用组织块分离法和平板划线法对其内生真菌进行分离、纯化,结合菌落形态、显微形态和生理生化特性对其种属进行了鉴定。分别研究了40株内生真菌菌体乙醇提取物和发酵液乙酸乙酯萃取物共计80个样品的抑菌活性、抗氧化活性和α-糖苷酶抑制活性。在此基础上,主要从细胞膜通透性、完整性和DNA凝胶阻滞等方面研究了B06次级代谢产物乙酸乙酯萃取物(B06e)对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑制机理。主要研究结果如下:(1)从6种中药材中分离纯化得到137株内生真菌,分别属于曲霉属(Aspergillus)、根霉属(Rhizopus)、青霉属(Penicillium)、镰孢霉属(Fusarium)、毛霉属(Mucor)、头孢霉属(Cephalosporium)和粘帚霉属(Gliocladium)。(2)80个样品均表现出一定的抑菌活性、抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。抑菌试验结果表明,B06e对大肠埃希氏菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.s aureus)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)和铜绿假单胞杆菌(P.aeruginosa)四种供试菌株具有较强的抑制活性,抑菌圈直径均大于17mm,最小抑菌浓度(MIC)小于50μg/m L。抗氧化活性结果表明,Z05次级代谢产物乙酸乙酯萃取物总还原力最强(吸光值为1.354±0.051),半数效应浓度0.5664 mg/m L。F12的菌丝体提取物和S24次级代谢产物乙酸乙酯萃取物对羟基自由基(?OH)的清除率分别为75.29%±4.00%和94.37%±1.26%,其中S24乙酸乙酯萃取物的IC50(0.2405mg/m L)低于阳性对照Vc(0.2648 mg/m L),表现为极强的?OH的清除能力。DPPH自由基清除试验结果显示,8个样品的清除率高达90%以上,其中S05的菌丝体乙醇提取物的DPPH清除率为98.70%±0.45%(0.5mg/m L)IC50值为0.0554,低于阳性对照Vc的IC50值0.0845,表现出较强的DPPH自由基清除活性。而各样品对超氧阴离子自由基的清除活性均低于80%。α-葡萄糖苷酶抑制实验结果表明,37个样品对α-葡萄糖苷酶抑制率大于70%,其中Z003的菌丝体乙醇提取物的抑制率最高为96.11%±0.57%,IC50值为0.1928 mg/m L。(3)B06e抑菌试验表明,B06e的抑菌机制主要是通过诱导细菌细胞膜通透性发生改变,內溶物渗漏,B06e进入细胞与核酸物质发生作用,从而引起细胞稳态破坏,抑制微生物的生长繁殖。 |
| 语种 | 中文 |
| 页码 | 67 |
| URL标识 | 查看原文 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/91971]  |
| 专题 | 兰州理工大学 |
| 作者单位 | 兰州理工大学 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 王帆. 六种中药材内生真菌的分离纯化及其发酵产物活性研究[D]. 2016. |
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