基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究 | |
胡胜杰1; 黄永东2; 赵岚2; 朱凯2; 苗壮2; 王飞3; 晋洪超3; 李建4; 杨珺4; 汪和睦4 | |
刊名 | 过程工程学报 |
2020 | |
卷号 | 20期号:10页码:1198 |
关键词 | hepatitis B surface antigen particle integrity silica gel adsorption/desorption response surface methodology hydrophobic interaction chromatography 乙肝表面抗原 颗粒完整性 硅胶吸附/解吸附 响应面法 疏水层析 |
ISSN号 | 1009-606X |
英文摘要 | 针对重组汉逊酵母乙肝表面抗原(HBsAg)在传统纯化过程中稳定性差的问题,采用静态光散射、荧光光谱和动态光散射等分析手段,从颗粒完整性角度研究其在不同pH条件下的稳定性变化。以其为指导,采用硅胶吸附/解吸附纯化HBsAg,建立该过程中关键因素的响应面模型,并与疏水层析联用,进一步纯化HBsAg,分析纯化效果以及纯化后疫苗颗粒完整性。采用透射电镜观察纯化后疫苗形貌,用高效分子排阻色谱法(HPSEC)分析颗粒稳定性。结果表明在酸性溶液下,pH接近HBsAg等电点时,抗原颗粒间静电斥力减小,颗粒容易聚集;碱性条件下,抗原颗粒内部疏水基团暴露,造成颗粒解聚。建立响应面模型,以活性收率为响应值时,最佳纯化工艺为吸附pH=7.43,洗脱pH=10.48,洗脱温度55.4℃,此时活性收率最高为39.1%;以纯化倍数为响应值时,吸附pH=7.16,洗脱pH=10.52,洗脱温度55.1℃,此时纯化倍数最高为1.90。进一步对洗脱液进行疏水层析纯化,活性收率为49.73%,颗粒完整性为85.79%,透射电镜观察到抗原颗粒粒径为20~40 nm。与传统疏水层析方法相比,采用硅胶吸附/解吸附与疏水层析联用的纯化方法,疫苗活性收率提高31.99个百分点,颗粒完整性提高20.90个百分点,颗粒稳定性提高22.93个百分点。该研究为高效纯化重组HBsAg及提高疫苗纯化过程的颗粒完整程度等提供新思路。 |
语种 | 英语 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/47452] |
专题 | 中国科学院过程工程研究所 |
作者单位 | 1.河北农业大学 2.中国科学院过程工程研究所 3.北京石油化工学院 4.天津和睦健民生物科技有限公司 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 胡胜杰,黄永东,赵岚,等. 基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究[J]. 过程工程学报,2020,20(10):1198. |
APA | 胡胜杰.,黄永东.,赵岚.,朱凯.,苗壮.,...&袁洪水.(2020).基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究.过程工程学报,20(10),1198. |
MLA | 胡胜杰,et al."基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究".过程工程学报 20.10(2020):1198. |
个性服务 |
查看访问统计 |
相关权益政策 |
暂无数据 |
收藏/分享 |
除非特别说明,本系统中所有内容都受版权保护,并保留所有权利。
修改评论