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题名	两步层析法纯化虎杖、红花中活性成分及部分药理研究
作者	张达磊
学位类别	博士
答辩日期	2009-06-30
授予单位	中国科学院研究生院
导师	苏志国
关键词	两步层析 分离纯化 虎杖 红花 活性物质 脑缺血
其他题名	A two-step chromatography strategy for simultaneous isolation of main active components from polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc. and carthamus ticctorious L. and partial pharmacology study
学位专业	生物化工
中文摘要	本文尝试建立一种两步层析法从一种植物中同时获得多种高纯度天然产物的分离模式。其中，初分离阶段采用大孔吸附树脂层析，精制阶段采用自主研制的高分辨率聚合物介质进行反相层析，分离对象为从虎杖中获得高纯度的白藜芦醇苷、白藜芦醇、蒽苷B；从红花中获得羟基红花黄色素A和红花黄色素B。 首先，建立了虎杖中的白藜芦醇苷、白藜芦醇、蒽苷B以及红花中的羟基红花黄色素A和红花黄色素B的HPLC分析检测方法，该方法快速、稳定，成为分离过程中跟踪检测目标产物的有效手段。第一步层析采用HPD-600大孔吸附树脂作为虎杖的初分离介质，在优化条件下白藜芦醇苷、白藜芦醇及蒽苷B的浓度从原料中的7.5%、1.3%及2.4%提高到32.6%、8.2%及15.8%，回收率为92.3%、91.7%及92.8%。采用AB-8作为红花的初分离介质，羟基红花黄色素A和红花黄色素B纯度达到13.6%和10.5%，回收率为86.2%和89.3%。 第二步层析比较了自制的两种新型聚苯乙烯介质：PDVB-SPG（SPG膜乳化法）、PDVB-Swelling（两步溶涨法）与商品化的硅胶键合相C18介质的分离效果。两种自制介质的分离效果优于C18硅胶介质：分离虎杖目标产物所得样品的回收率及纯度均在90%以上，而C18硅胶介质所得样品纯度只有80%左右，回收率只有70%左右；分离红花黄色素B的纯度均在90%以上，回收率在80%以上，而C18硅胶介质分离所得红花黄色素B纯度只有70%左右，回收率只有60%左右。 将上述两步层析整合到分离纯化工艺中，采用乙醇提取、大孔吸附树脂层析、PDVB-SPG反相制备层析和结晶四个步骤，替代传统多级液液萃取及硅胶层析分离的过程，从虎杖中获得了纯度大于98%的白藜芦醇苷、白藜芦醇及蒽苷B，过程的总回收率分别为81.3%，77.4%，80.2%。采用乙醇提取、大孔吸附树脂层析与PDVB-Swelling反相制备层析相结合，替代了传统的水煮、醇沉的工艺，从红花中分离得到纯度大于95%的羟基红花黄色素A和红花黄色素B，过程的总回收率分别达到70.3%和72.4%。 研究了红花黄色素B和蒽苷B对脑缺血引起的脑损伤的保护作用及其机理。红花黄色素B 能够对永久性脑缺血和脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用且呈剂量依赖性，同时具有合适的治疗时间窗，其作用机制与抗自由基损伤，改善脑线粒体能量代谢有关；蒽苷B对脑缺血再灌注及谷氨酸引起的神经损伤具有明显的保护作用，其作用机理与其具有抗氧化活性，降低谷氨酸引起的神经毒性有关。
语种	中文
公开日期	2013-09-23
页码	201
内容类型	学位论文
源URL	[http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1648]
专题	过程工程研究所_研究所（批量导入）
推荐引用方式 GB/T 7714	张达磊. 两步层析法纯化虎杖、红花中活性成分及部分药理研究[D]. 中国科学院研究生院. 2009.

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