题名高效液相色谱-蒸发光散射法快速检测茄尼醇、青蒿素和薯蓣皂甙类化合物
作者周华英
学位类别硕士
答辩日期2006-05-17
授予单位中国科学院过程工程研究所
授予地点过程工程研究所
导师刘春朝
关键词高效液相色谱 蒸发光散射检测器 微波辅助提取 茄尼醇 青蒿素 薯蓣皂甙 原薯蓣皂甙 纤细薯蓣皂甙
学位专业生物化工
中文摘要成分分析是天然产物有效成分分离纯化和质量控制的基础。本文以萜类化合物茄尼醇、内酯类化合物青蒿素、皂甙类化合物薯蓣皂甙、原薯蓣皂甙和纤细薯蓣皂甙为例,采用微波辅助提取快速制备样品,用HPLC-ELSD进行检测,建立了具有普适性的无紫外吸收或紫外末端吸收化合物的快速分析方法。 微波辅助提取具有提取率高和提取时间短的明显优点。与室温浸提、加热回流提取、索氏提取相比,在获得相同提取率的前提下,微波辅助提取时间缩短了80%-97%,在40min内实现样品的快速制备。通过扫描电子显微镜观察微波处理前后的样品细胞结构变化,发现微波能够破坏细胞结构,从而加快细胞中有效成分的溶出,加速提取进程。 采用HPLC-ELSD分析样品,选用反相键合相硅胶为固定相,以有机相或有机相与水的混合物为流动相,根据化合物性质调整流动相比例,并在此基础上在60-100℃范围内调整ELSD漂移管温度,在1.3-3.0L/min范围内调整氮气流速,可以在10-22min内完成样品分析。建立了方法的评价体系,对茄尼醇、青蒿素和薯蓣皂甙类化合物HPLC-ELSD快速测定方法的评价结果如下:确定了各化合物的线性范围,相关系数r>0.9990;重复性实验表明相对保留时间的相对标准偏差RSD<0.5%,相对峰面积的RSD<3%;最低检测限<40μg/mL;最低定量限<100μg/mL;对准确性进行评价,平均加样回收率95%-105%;中间精密度实验结果为相对保留时间的RSD<1%,相对峰面积的RSD<8%。 将微波提取快速样品制备和HPLC-ELSD分析方法相结合建立的快速检测方法应用于不同产地烟叶中茄尼醇含量测定,结果表明不同产地对烟叶中茄尼醇含量存在显著影响;将该快速检测方法用于分析青蒿植株不同部位青蒿素的含量,中部叶片含青蒿素最多,其次为上部叶、花蕾和下部叶,根和茎中不含青蒿素;最后将该快速检测方法成功应用于不同批次穿龙薯蓣饮片中皂甙类化合物的指纹图谱研究中,快速测定了重要指标成分薯蓣皂甙、原薯蓣皂甙和纤细薯蓣皂甙。
语种中文
公开日期2013-09-13
页码73
内容类型学位论文
源URL[http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1077]  
专题过程工程研究所_研究所(批量导入)
推荐引用方式
GB/T 7714
周华英. 高效液相色谱-蒸发光散射法快速检测茄尼醇、青蒿素和薯蓣皂甙类化合物[D]. 过程工程研究所. 中国科学院过程工程研究所. 2006.
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