| 题名 | 新疆雪莲快繁体系的建立和抗逆性研究 |
| 作者 | 徐春明 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2007-06-04 |
| 授予单位 | 中国科学院过程工程研究所 |
| 授予地点 | 过程工程研究所 |
| 导师 | 王玉春 |
| 关键词 | 新疆雪莲 生物反应器 快速繁殖 生理生化 抗逆性 |
| 学位专业 | 生物化工 |
| 中文摘要 | 新疆雪莲是我国的传统药材，其药用成分种类丰富，民间用其治疗多种疾病。目前，由于滥采滥挖，新疆雪莲野生植物资源已濒临枯竭，而市场的需求不断增加，导致供需矛盾日渐突出。为了解决新疆雪莲资源短缺的问题，本研究以植物细胞工程为手段建立了新疆雪莲快速繁殖体系，并对其抗旱性和抗盐性进行研究，为实现新疆雪莲大规模人工种植奠定基础。 研究了愈伤组织诱导最适条件，MS培养基添加2.0mg/L NAA和0.5mg/L 6-BA，蔗糖浓度30g/L，苗龄21d，根、叶和胚轴的诱导率分别可达到96.5%，91.2%和85.3%。愈伤组织生长培养基同诱导培养基，最适光照周期是16h/d，培养温度18℃，接种量是2gDW/L，叶、胚轴和根愈伤组织生物量分别达到16.3、16.5和16.8gDW/L。芽分化的最佳条件是叶愈伤组织，在MS培养基添加0.05mg/L NAA和0.5mg/L 6-BA。最佳分化条件是温度20℃，光照是16h/d，分化率达5.68；在红光下的分化率比在其它光质下高；添加0.06mg/L的ABA或4mg/L的AgNO3在一定程度上可以促进芽分化。 建立了胚性愈伤组织的悬浮培养体系，悬浮培养最佳条件为3%的接种量，在MS培养基中添加2.0mg/L NAA和0.5mg/L 6-BA，添加30g/L蔗糖培养20d。最大生物量为18.39gDW/L。新疆雪莲细胞生物反应器培养的最佳条件是接种量为2.5gDW/L，通气量为0.3L/min和光照时间为16h/d，生物量达11.5gDW/L。培养的胚性愈伤组织的有出芽能力的占92.1%，分化率为3.48。 研究了新疆雪莲分化过程中的生理生化变化。在整个培养阶段胚性愈伤组织中的蛋白质含量和抗氧化酶活性均高于非胚性愈伤组织。α-淀粉酶活性保持稳定。胚性愈伤组织中的β-淀粉酶活性较高。β-淀粉酶在整个培养过程中呈现双峰曲线。可溶性糖保持稳定，只是胚性愈伤组织在芽分化阶段可溶性糖的含量有一定的上升。 研究了新疆雪莲组培苗生根的最佳条件是1/2MS+2%蔗糖+0.2mg/L IAA；生根率达到100%，根数达9.75，根长为18.2mm。添加1mg/mL活性炭或0.2mg/L多效唑也能改善生根状况。在生根过程中，植物体内IAA氧化酶活性在1-16d上升，16-20d下降。在前16d PPO活性持续上升，第16d达到最大，此后PPO活性基本持平。前16d POD活性直线上升，然后缓慢下降。组培苗根数在8条以上，覆膜时间在15d左右，基质为在壤土上方覆盖2cm的珍珠岩的情况下，成活率最高达74.1%。 确定了新疆雪莲有效成分的色谱分析方法。并通过检测得出结论，组培苗植株芦丁和绿原酸含量高于《中华人民共和国药典》（2005版）所规定0.15％的标准。 研究了新疆雪莲的抗盐抗旱生理。在各个盐浓度下，巴里坤苗的含水量变化的幅度较小；可溶性蛋白、脯氨酸含量比和静苗的含量高；MDA含量比和静苗低；在100mM浓度下巴里坤苗的SOD、APOX、CAT活性比和静苗高1.16倍、2.65倍和16.0%。在模拟干旱的情况下，巴里坤苗在处理下的水分含量、可溶性蛋白含量和脯氨酸含量高于和静苗。在30% PEG6000的胁迫浓度下，巴里坤苗的水分含量、脯氨酸含量比和静苗高6%、35.7%；MDA含量低28.5%；巴里坤苗的SOD、APOX、CAT活性大小分别比和静苗高16.5%、27.1%、12.1%。因此，巴里坤苗的耐盐耐旱性好于和静苗。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2013-09-13 |
| 页码 | 169 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1042]  |
| 专题 | 过程工程研究所_研究所（批量导入） |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 徐春明. 新疆雪莲快繁体系的建立和抗逆性研究[D]. 过程工程研究所. 中国科学院过程工程研究所. 2007. |
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