题名 | 芹菜籽和鹰嘴豆中多肽成分的分离及其生物活性研究 |
作者 | 马庆苓 |
答辩日期 | 2011-06-03 |
授予单位 | 中国科学院研究生院 |
授予地点 | 中国科学院新疆理化技术研究所 |
导师 | 阿吉艾克拜尔·艾萨 |
关键词 | 芹菜籽 鹰嘴豆 多肽 生物活性 提取 |
学位名称 | 博士 |
学位专业 | 有机化学 |
英文摘要 | 1. 在维吾尔药中,芹菜籽主要用于治疗高血压、关节炎、类风湿关节炎、肾脏等疾病。研究芹菜籽中的活性多肽及其抗氧化活性,为全面解析芹菜籽的药理作用提供了理论依据。 采用单因素实验(提取温度、提取固液比、提取时间和提取溶液pH对提取多肽的量的影响)和正交试验,确定了芹菜籽多肽最佳提取工艺条件:即pH=9.0,物料比为1:5的条件下,超声提取30 min;通过对多肽进行清除ABTS自由基作用的研究,结果表明利用此提取工艺条件并没有改变所提取的芹菜籽多肽清除ABTS自由基的能力。 利用磷酸盐缓冲溶液提取、硫酸铵沉淀芹菜籽中的多肽类化合物,采用阴阳离子交换树脂相结合的方法分离提取的多肽类物质,并采用HW-55F分子筛、Sephadex G-75凝胶柱层析、HPLC制备色谱分离以及超滤等进行纯化提取的多肽,共得到三个单体多肽;其中一个中性多肽,其分子量为5.005 kDa, N-端氨基酸序列为:H2N-Ala-Arg-Asp-Glu-Asn-Thr-Ala-Asp-Ala-Tyr-Arg-Val-Pro-Pro- Val;一个碱性多肽,分子量为11.39 kDa,其N-端氨基酸序列为:H2N- Ala-Ser-Lys-Glu- His-Lys-Glu-Arg-Gln-Pro;一个酸性多肽,分子量为6.5 kDa。 对芹菜籽多肽进行抗氧化活性分析,结果表明芹菜籽酸性多肽组分清除ABTS自由基的作用最强,其IC50的值为8.23 μg/mL;三个纯化多肽IC50值分别为182.0615 μg/mL(QCZCMW)、158.7 μg/mL(QCZDE)和193.2 μg/mL(QCZCM-2)。 2. 鹰嘴豆是维吾尔医药食两用植物,具有降血糖、降血脂的作用。鹰嘴豆发芽后,其营养成分发生了变化,大分子蛋白质发生降解。研究鹰嘴豆和发芽后的鹰嘴豆中的多肽及其生物活性,对于解析鹰嘴豆发芽过程中大分子降解过程以及研究鹰嘴豆及其药理活性提供了科学依据。 利用芹菜籽多肽提取、分离、纯化的方法,从脱脂的鹰嘴豆原豆得到两个多肽:碱性多肽YZDCM的分子量为5.483 kDa,氨基酸序列为H2N-Ala-Cys-Cys-Glu-Asn-Lue-Ala-Asp-Thr-Tyr- Arg-Gly-Pro-Cys-Phe,此多肽属于防御素一族;酸性多肽YZDDEAE的分子量约8.0 kDa。 利用芹菜籽多肽提取、分离、纯化的方法,从发芽后的鹰嘴豆豆瓣得到三个单体多肽:YZDBCM-1分子量为9.086 kDa,N端氨基酸序列为H2N-Ala-Ile-Thr- Cys-Gly-Arg-Val-Ser-Ala-Ala-Leu-Ala-Pro-Pro-Leu.,是一个新型的、富含丙氨酸的、新型碱性多肽,是由鹰嘴豆发芽过程中大分子蛋白质降解产生的;YZDBCM-2分子量为5.411 kDa,YZDBCM-3分子量为4.688 kDa。 生物活性筛选结果表明,发芽后的鹰嘴豆豆瓣中提取的多肽的总体来说要比原豆中的多肽强,且碱性多肽的活性普遍要比中性和酸性多肽的活性强;其中豆瓣YZDB-50%C对人结肠腺癌细胞的抑制作用最强,其半数抑制浓度(IC50)为3.8 μg/mL,而纯化的鹰嘴豆碱性多肽YZDCM对人结肠腺癌细胞的半数抑制浓度(IC50)为1.74 μg/mL。鹰嘴豆豆瓣YZDBCM-1对细菌和人结肠腺癌细胞均无抑制作用,但是有较强的清除ABTS自由基的作用,其IC50的值为156.2 μg/mL(即17.20 μmol/L)。 |
内容类型 | 学位论文 |
源URL | [http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/4447] |
专题 | 新疆理化技术研究所_资源化学研究室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 马庆苓. 芹菜籽和鹰嘴豆中多肽成分的分离及其生物活性研究[D]. 中国科学院新疆理化技术研究所. 中国科学院研究生院. 2011. |
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