DN-AMPK腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12肌管分化中的影响

	DN-AMPK腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12肌管分化中的影响
	杨成红 1; 邓思思 2; 臧奕 2
刊名	生物技术通报
	2012
卷号	000 期号:004 页码:135
关键词	DN-AMPK 腺病毒 C2C12 肌管分化
ISSN号	1002-5464
英文摘要	在研究AMPK的调控网络时,通常利用过表达显性失活突变型AMPK（dominant negative AMPK,DN-AMPK）作为研究手段来验证AMPK在某些重要生理病理调节通路中的关键作用。旨在利用Ad5腺病毒载体体系构建Ad-DN-AMPK表达载体,并在成肌细胞系C2C12中检测无活性AMPK高表达后对C2C12细胞分化为肌管细胞的影响。通过构建AMPKα1（D159A）和AMPKα2（K45R）的腺病毒表达载体,在HEK293细胞中成功包装并扩增出完整的腺病毒,待其感染能力基本稳定后,将腺病毒感染C2C12,利用激光定量成像仪检测其感染滴度,感染效率能高达100%,并且能够持续表达6 d。DN-AMPK高表达后,AMPK常用激活剂A769662（SN-5）不能激活AMPK,表现为AMPK下游蛋白活性丧失,如ACC磷酸化无变化。通过实时定量PCR的方法,检测DN-AMPK对C2C12分化为肌管细胞的影响,结果表明过表达DN-AMPK能够促进C2C12细胞分化为肌管细胞的标记蛋白（Myod和Myogenin）的表达,即促进C2C12分化为肌管细胞。
语种	英语
内容类型	期刊论文
源URL	[http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/285706]
专题	中国科学院上海药物研究所
作者单位	1.华东师范大学 2.中国科学院上海药物研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	杨成红,邓思思,臧奕. DN-AMPK腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12肌管分化中的影响[J]. 生物技术通报,2012,000(004):135.
APA	杨成红,邓思思,&臧奕.(2012).DN-AMPK腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12肌管分化中的影响.生物技术通报,000(004),135.
MLA	杨成红,et al."DN-AMPK腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12肌管分化中的影响".生物技术通报 000.004(2012):135.