microRNA-1254调控血红素氧化酶1表达的机制 | |
李成刚; 戚新明![]() ![]() | |
2013-11-12 | |
关键词 | microRNA1254 血红素氧化酶1 |
卷号 | 27 |
页码 | 1 |
英文摘要 | 目的寻找能有效调节血红素氧化酶1(HO-1)表达的microRNA并对其调节机制进行研究。方法使用脂质体法将microRNA模拟物及其突变体转入细胞,Western blot及realtime PCR分别检测HO-1蛋白及mRNA表达量,luciferase荧光素酶报告基因检测microRNA模拟物及其突变体对HO-1基因启动子及3'UTR的作用。结果 miR-1254可能对血红素氧化酶1表达具有调节作用。本课题发现在经氯化血红素诱导而高表达HO-1的HEK293和自然状态下高表达HO-1的A549细胞系中,外源转入miR-1254模拟物均可观察到HO-1的mRNA及蛋白水平显著降低,证实miR-1254是能够有效调节HO-1表达的microRNA,而抑制内源性的miR-1254,可以使HO-1的mRNA及蛋白水平升高,直接证明了内源性miR-1254对HO-1具有抑制作用。随后,将miR-1254模拟物与含有HO-1的3'非翻译区(3'UTR)重组荧光素酶质粒共同转入细胞,发现miR-1254能够降低重组质粒荧光素酶的表达,而将HO-1的3'UTR上与miR-1254结合位点突变后这种抑制作用消失,提示miR-1254可能具有翻译抑制的功能;同样的方式我们发现miR-1254对HO-1可能还具有转录抑制作用;最后,miR-1254突变实验证明,其5'端的"种子区序列"对转录后抑制是重要的。结论 miR-1254能够有效的调节HO-1的表达,并且可能是以转录水平和转录后水平双重抑制的机制进行调节。 |
会议录 | 中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要
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文献子类 | Article |
语种 | 中文 |
内容类型 | 会议论文 |
源URL | [http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/267129] ![]() |
专题 | 药物安全性评价中心 |
作者单位 | 中国科学院上海药物研究所,药物安全性评价中心,上海 201203, 中国. |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 李成刚,戚新明,任进. microRNA-1254调控血红素氧化酶1表达的机制[C]. 见:. |
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