人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

	人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定
	王鸿鹤; 朱孝峰; 谢冰芬; 冯公侃; 沈竞康; 刘宗潮
刊名	中山大学学报(医学科学版)
	2003-09-20
期号	05 页码:444-447
关键词	细胞周期蛋白D1 CDK4
文献子类	Article
英文摘要	【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。
资助项目	国家自然科学基金资助项目[30100227] ; 国家863课题资助项目[2001AA234011] ; 中山医科大学“211工程”肿瘤学重点学科基金资助项目[98069]
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/270210]
专题	药物化学研究室
推荐引用方式 GB/T 7714	王鸿鹤,朱孝峰,谢冰芬,等. 人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定[J]. 中山大学学报(医学科学版),2003(05):444-447.
APA	王鸿鹤,朱孝峰,谢冰芬,冯公侃,沈竞康,&刘宗潮.(2003).人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定.中山大学学报(医学科学版)(05),444-447.
MLA	王鸿鹤,et al."人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定".中山大学学报(医学科学版) .05(2003):444-447.