利用内源荧光筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂

	利用内源荧光筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂
	韩雪 1; 董旭 2; 蒋文学 2; 黄鹏 1; 张纬萍 1; 唐淳 2
刊名	浙江大学学报医学版
	2014
卷号	43 期号:3 页码:319
ISSN号	1008-9292
英文摘要	目的:建立内源荧光检测筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)抑制剂的方法。方法:以1,4-二马来酰亚胺基丁烷(BMB)交联G355C/D393C双突变NAMPT,封堵其催化活性中心,以野生型及交联型NAMPT蛋白的自发荧光变化(280 nm激发波长,333 nm发射波长)检测化合物与蛋白的结合,以核磁共振方法体外检测化合物对NAMPT催化作用的影响,以MTT方法检测化合物对人肺癌A549细胞活性的影响。结果:FK866在0.1~1.0 μmol/L浓度范围内能浓度依赖地抑制野生型NAMPT自发荧光,但对交联型NAMPT的自发荧光没有影响。迷迭香酸、洋蓟素、1,3二咖啡奎宁酸对两种蛋白自发荧光的抑制率无显著差异。FK866能够显著抑制NAMPT的催化作用,但迷迭香酸、洋蓟素、1,3二咖啡奎宁酸对NAMPT的催化作用无抑制作用。FK866显著抑制A549细胞的活性,而迷迭香酸、洋蓟素、1,3二咖啡奎宁酸对A549细胞活性无抑制作用。结论:基于野生型和交联型NAMPT蛋白的内源性荧光检测法可以筛选与NAMPT蛋白结合的化合物,并分析化合物是否结合在NAMPT的催化活性部位,迷迭香酸、洋蓟素、1,3二咖啡奎宁酸可结合在NAMPT催化活性位点以外的部位。
语种	英语
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.wipm.ac.cn/handle/112942/18958]
专题	中国科学院武汉物理与数学研究所
作者单位	1.浙江大学 2.中国科学院武汉物理与数学研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	韩雪,董旭,蒋文学,等. 利用内源荧光筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂[J]. 浙江大学学报医学版,2014,43(3):319.
APA	韩雪,董旭,蒋文学,黄鹏,张纬萍,&唐淳.(2014).利用内源荧光筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂.浙江大学学报医学版,43(3),319.
MLA	韩雪,et al."利用内源荧光筛选烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂".浙江大学学报医学版 43.3(2014):319.