| 题名 | 洋葱伯克霍尔德菌CF-66 环二肽的分离纯化及性质研究 |
| 作者 | 王艾晶 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2010-05-21 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 导师 | 权春善 |
| 学位专业 | 生物化工 |
| 中文摘要 | 环二肽种类繁多、功能各异且分布广泛。本实验室前期研究发现洋葱伯克霍尔德菌CF-66 可产生五种环二肽。文中从该菌发酵液中分离纯化出一种环二肽—cyclo(Phe-Pro，cFP)，并对其性质进行研究。 ⒈ cFP 的分离与纯化。用乙酸乙酯萃取该菌的发酵液，所得粗提液先后进行硅胶柱层析和反相高效液相层析，摸索出最佳的流动相种类、极性比例和洗脱方式，用UV 和HPLC 检测分离所得物质，最后经标准曲线计算出其浓度约为0.8mg/ml，产率约为2 mg/L。 ⒉ 分离纯化物质的结构鉴定。该物质真空干燥后呈白色粉末，易溶于有机溶剂，但微溶于水(＜10mg/ml)。茚三酮染色显示其结构中无游离氨基端存在。分别应用GC-MS、紫外光谱、红外光谱和核磁共振分析技术对其结构进行深入的表征，确定其为cFP。 ⒊ cFP 生物活性的研究。拮抗实验表明：cFP 对多种植物病原真菌有抑制作用，使菌丝形态发生畸变，且对产孢真菌孢子的萌发有毒力。以串珠镰刀菌为指示菌，测定cFP对其MIC 和MFC 值分别为31.25 和125μg/ml。cFP 抑制串珠镰刀菌的生长，使其对数生长期滞后。细胞膜通透性实验和FDA、PI 双染实验结果表明，cFP 的作用方式为：低浓度抑制和高浓度杀死。CFW 染色结果说明：cFP 的作用靶点不在细胞壁上。2D 结果初步表明：cFP 对串珠镰刀菌总蛋白的表达有影响，具体的分析有待深入进行。 |
| 语种 | 中文 |
| 学科主题 | 物理化学 |
| 公开日期 | 2012-07-10 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://159.226.238.44/handle/321008/116602]  |
| 专题 | 大连化学物理研究所_中国科学院大连化学物理研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 王艾晶. 洋葱伯克霍尔德菌CF-66 环二肽的分离纯化及性质研究[D]. 中国科学院研究生院. 2010. |
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