山蛭素(haemadin)在毕赤甲醇酵母中的表达及其性质鉴定; Expression of Haemadin in Methylotrophic Yeast Pichia Pastoris and Its Purification and Characterization | |
赵菁菁 ; 茹炳根 | |
刊名 | 北京大学学报 自然科学版 |
2005 | |
关键词 | 山蛭素 凝血酶抑制剂 毕赤酵母表达 抗凝剂 |
DOI | 10.3321/j.issn:0479-8023.2005.04.002 |
英文摘要 | 人工合成山蛭素基因后,利用基因重组的方法将山蛭素的基因克隆到pPicZαA载体,经过线性化,电转至毕赤酵母GS115中表达.使用浓度高达1 500 μg/mL的zeocin筛选得到高拷贝插入的GS115-H菌株,经过优化摇瓶表达条件表达量达到100 mg/L.摇瓶培养物经离心取上清,分别使用3 kD和10 kD的超滤膜超滤,阳离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化步骤之后,得到纯度高于95%的目的蛋白,产出量为40 mg/L,回收率为40%.通过以chromozym TH为底物的凝血酶酰胺水解实验证实了其体外生物学活性:其抑制凝血酶常数为(2.46±0.13)×10-13 mol/L.; 中文核心期刊要目总览(PKU); 中国科学引文数据库(CSCD); 0; 4; 506-513; 41 |
语种 | 中文 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.pku.edu.cn/handle/20.500.11897/46550] |
专题 | 生命科学学院 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 赵菁菁,茹炳根. 山蛭素(haemadin)在毕赤甲醇酵母中的表达及其性质鉴定, Expression of Haemadin in Methylotrophic Yeast Pichia Pastoris and Its Purification and Characterization[J]. 北京大学学报 自然科学版,2005. |
APA | 赵菁菁,&茹炳根.(2005).山蛭素(haemadin)在毕赤甲醇酵母中的表达及其性质鉴定.北京大学学报 自然科学版. |
MLA | 赵菁菁,et al."山蛭素(haemadin)在毕赤甲醇酵母中的表达及其性质鉴定".北京大学学报 自然科学版 (2005). |
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