高通量基因克隆、表达技术平台建立以及对变形链球菌若干蛋白的晶体结构研究 | |
李兰芬 ; 张晓嫣 ; 南洁 ; 梁宇和 ; 郭丽宏 ; 林久祥 ; 魏世成 ; 苏晓东 | |
2008 | |
关键词 | 变形链球菌 异源蛋白 高通量基因 扩增基因 基因克隆 基因组研究 表达载体 技术筛选 重组蛋白 晶体结构 |
英文摘要 | 目的:为搭建适合于国内结构基因组研究的高通量、低成本基因克隆、蛋白表达、纯化、晶体筛选、X-射线晶体衍射技术平台,寻找适合于变形链球菌蛋白高效表达的体系和条件,对变形链球菌ATCC25175国际标准株中27个和全基因组测序株UA159中近300个基因依次选取进行试验。方法:对比手工操作或利用Beckman-Coulter Biomek FX机器人进行大规模蛋白质生产先期研究,实验流程包括:制备变形链球菌基因组DNA模板,筛选靶基因,自动化引物设计,PCR体外扩增基因,常规克隆将片段插入表达载体pET28a中,IPTG诱导异源蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶性大量表达,His6标签镍...; 0 |
语种 | 中文 |
内容类型 | 其他 |
源URL | [http://ir.pku.edu.cn/handle/20.500.11897/46170] ![]() |
专题 | 生命科学学院 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 李兰芬,张晓嫣,南洁,等. 高通量基因克隆、表达技术平台建立以及对变形链球菌若干蛋白的晶体结构研究. 2008-01-01. |
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