题名黍子叶绿体光系统Ⅱ32kDa蛋白基因:psbA的分子克隆及其在不同光质诱导下的转录调节
作者马建忠
答辩日期1991
文献子类博士
授予单位中国科学院植物研究所
导师汤佩松 ; 匡廷云 ; 娄世庆
其他题名Molecular Cloning and Transcriptional Regulating by Light Quality of Chloroplast psbA Gene for the 32kDa Protein of PhotosystemII from Broomcorn Millet (Panicum miliaceum)
学位专业植物生理学及分子生物学
英文摘要本文以我国的一种古老作物也是一种C4植物一黍子(Pannicum miliaceum)为材料,克隆了其叶绿体光系统Ⅱ反应中心32kDa蛋白的基因—psbA,研究了不同光质对其表达的影响,并讨论了psbA转录调控的可能机理。 用无水法从黍子幼,苗分离其叶绿体,裂解后用常规的饱和酚抽提法制备cpDNA,并用于A-T含量测定,电镜观察和psbA的基因克隆.结果表明,黍子cpDNA的A-T含量(67%)与其它高等植物的A-T含量(61-67%)基本一致。根据电镜观察,其分子大小在36-40um之问,相当于79×l06Da或127kb。除了环状的大分子cpDNA外,我们也观察到了一些环状的小分子cpDNA。据此,我们认为,叶绿体基因组在体内可能是处于一种动态的变化过程中,这种变化或许是适应其功能的需要,也或许是内共生系统进化过程中遗留下来的叶绿体祖先的行为。 黍子cpDNA经EcoRI消化后,建立了专一性片段的克隆库,并从中筛选出了呈psbA杂交阳性的克隆.Southern杂交结合限制性内切酶分析表明,含黍子psbA的EcoRI的限制片段长约2.Okb,较水稻和大麦的短约0.2kb。 以白光、红光,兰光、远红光和黑暗五种不同的处理培养黍子幼苗,叶片采收后用于叶绿素积累,高分子量cpRNA积累和psbA的Northern Spot分析。结果表明,不同的光质促进叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的效率是平行的,其中红光较兰光和远红光有效,而复合光(白光)的作用效果最好。当以白光的效率为100%时,我们可以分别求出不同光质对叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的相对效率值,表明高分子量cpRNA的积累对光的依赖性要比叶绿素积累对光的依赖性大的多。psbA的Northern Spot分析表明,不同光质下psbA转录本的积累与高分子cpRNA的积累是一致的。据此我们推测,在黍子叶绿体的光诱导发育过程中,psbA的转录过程可能不受光信号的直接调控,而是受叶绿体发育状态控制的恒定变化过程。其表达的调节作用可能主要在转译或转译后水平上。
语种中文
页码49
内容类型学位论文
源URL[http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/13753]  
专题中科院光生物学重点实验室
作者单位中国科学院植物研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
马建忠. 黍子叶绿体光系统Ⅱ32kDa蛋白基因:psbA的分子克隆及其在不同光质诱导下的转录调节[D]. 中国科学院植物研究所. 1991.
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