题名溶藻细菌对藻类的生理生态效应及作用机理研究
作者史顺玉
学位类别博士
答辩日期2006-05-15
授予单位中国科学院水生生物研究所
授予地点水生生物研究所
导师刘永定
关键词溶藻细菌,门多萨假单胞菌,嗜鳍黄杆菌,蜡样芽孢杆菌,葡萄球菌,绿色微囊藻,惠氏微囊藻,铜绿微囊藻,小颤藻,念珠藻,水华束丝藻,月芽藻,斜生栅藻,椭圆小球藻,水华鱼腥藻,极大螺旋藻,点形念珠藻,浮游颤藻,斜生栅藻,色球藻,水华
中文摘要针对我国水体富营养化及水华严重发生造成生态灾害的问题,探索浮游藻类控制、抑制水华发生的行之有效的途径是非常迫切的。在利用物理、化学和其它生物方法处理不甚理想的情况下,利用溶藻细菌控藻成为一个新的研究方向。溶藻细菌一般从湖泊水体直接分离,具有比较好的控藻效果,特别适合在水华发生初期使用,在短期内即可达到控制藻类生物量或阻止藻类大量增殖的效果。本研究分离筛选到四株高效的溶藻细菌,对其溶藻效应及机理进行了探索,推进了溶藻细菌对藻类的生理生态效应研究。 1.溶藻细菌的筛选、鉴定以及毒性检测。 1)在分离的58株细菌中,编号为DC10、DC21、DC22、DC-P的细菌菌株表现出较强的溶藻效果,因此以这四株细菌作为试验材料进行以下研究。 2)经中国典型培养物保藏中心鉴定,这四株细菌分别为门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina、葡萄球菌Staphylococcus sp.、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus以及嗜鳍黄杆菌Flavobacterium branchiophila。 3)通过对细菌的毒性检测发现,细菌DC21具有比较强的毒性,而细菌DC10、DC22及DC-P未产生毒素。 2.测定溶藻细菌的作用范围。 1)试验发现,细菌DC10对选用的绿色微囊藻、惠氏微囊藻、铜绿微囊藻、小颤藻、念珠藻、水华束丝藻等6种蓝藻以及绿藻门的月芽藻和斜生栅藻均有很强的溶藻作用。 2)细菌DC-P和DC22除了能溶解上述的三种微囊藻、水华束丝藻及小颤藻以外,还能溶解椭圆小球藻、水华鱼腥藻、极大螺旋藻以及点形念珠藻。 3)细菌DC21对上述的铜绿微囊藻、惠氏微囊藻、绿色微囊藻、念珠藻、水华束丝藻、月芽藻均有较大程度的溶解作用,但对浮游颤藻、斜生栅藻和色球藻的生长影响较小。 3.溶藻细菌对藻类生长及光合效能的影响。 1)溶藻细菌DC10、DC21、DC22及DC-P均能够强烈抑制藻类的生长,导致其叶绿素a含量或藻蓝蛋白含量显著下降。 2)溶藻细菌能够强烈抑制光合活性(由Fv/Fm值反映)。接入溶藻细菌后,藻类的Fv/Fm值剧烈下降或保持初始水平,而对照组的光合活性明显上升。 4.环境因子如温度、光照、pH以及氯化钙和硝酸钠的浓度对细菌溶藻效力的影响。 1)温度、pH以及氯化钙和硝酸钠的浓度对细菌DC-P 的溶藻效力具有较大影响,而光照对其影响较弱。在高温、酸性以及培养基中氯化钙和硝酸钠的浓度加倍的环境条件下,细菌DC-P的溶藻效力更强。 2)温度、光照、pH以及氯化钙和硝酸钠的浓度对细菌DC10的溶藻效力均有很强的影响。黑暗、低温、碱性以及培养基中氯化钙和硝酸钠的浓度加倍的环境条件,更利于细菌DC10溶藻。 3)温度、pH、光照以及氯化钙和硝酸钠的浓度对芽孢杆菌DC22的溶藻效力均有较大影响。在光周期(L:D=16:8)、高温、碱性以及培养基中氯化钙和硝酸钠的浓度加倍的环境条件下,细菌DC22具备更强的溶藻效力。 5.试验发现,溶藻细菌能够引起藻细胞膜脂过氧化及活性氧的大量积累,并激发藻细胞的抗氧化系统参与反应。 1)接入溶藻细菌后,藻细胞的丙二醛含量增高,说明其细胞膜脂过氧化。溶藻细菌引起藻细胞内活性氧的大量积累,后者是促使藻细胞死亡的重要原因。 2)保护自身免受其伤害,藻细胞内产生一些抗氧化酶类,通过提高其抗氧化酶的活性,增强其对有害活性氧的清除能力。但当藻细胞进一步氧化损伤,酶活性反受其衍生物的抑制,从而导致活性降低。 6.溶藻细菌作用机制的探讨。 1)细菌DC10、DC21的溶藻因子之一是其具有热稳定性的胞外分泌物,其溶藻成分的分子量范围分别为> 30 kDa和< 5 kDa,而细菌DC-P的溶藻成分可能是分子量范围在10- 30 kDa的一类亲水蛋白质。 2)细菌DC22首先接触水华束丝藻细胞壁的某些特定部位,降解其细胞壁,藻细胞内含物外溢。大约半分钟到一分钟后,整个细胞崩溃,死亡。除此之外,细菌DC22还引起水华束丝藻细胞的形态异常。 7.利用溶藻细菌技术进行野外控藻试验。 1)从滇池取水样置于玻璃水槽中,接入溶藻细菌第二天后,即可见溶藻效果。试验的第四天,水样即由浓绿变成乳白或浅土黄色。 2)藻细菌技术应用于云南滇池水体1500m3围隔,取得明显的控藻效果。接入溶藻细菌后,试验水体的透明度大幅度升高,叶绿素a含量及总磷含量显著降低。而总氮及COD含量,也有一定程度的降低。
语种中文
公开日期2010-11-16
页码123
内容类型学位论文
源URL[http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12176]  
专题水生生物研究所_中科院水生所知识产出(2009年前)_学位论文
推荐引用方式
GB/T 7714
史顺玉. 溶藻细菌对藻类的生理生态效应及作用机理研究[D]. 水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2006.
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