题名 | 通过优化Kex2酶切效率提高Pichia pastoris酵母分泌重组蛋白量的研究 |
作者 | 杨松 |
答辩日期 | 2013-08-01 |
文献子类 | 博士 |
授予单位 | 中国科学院研究生院 |
授予地点 | 广州生物院 |
导师 | 吴东海 |
关键词 | Pichia pastoris Kex2 P1' 蛋白表达 分泌 |
学位名称 | 博士 |
其他题名 | Enhanced production of recombinant secretory proteins in Pichia pastoris by optimizing Kex2 efficiency |
学位专业 | 生物化学与分子生物学 |
英文摘要 | Pichia pastoris是应用最为广泛的蛋白表达系统之一,常用于重组蛋白的分泌表达。但是这一蛋白表达系统的应用却受制于不同外源蛋白分泌表达产量的不可预测性,这一问题目前被认为至少部分缘于外源蛋白分子运输通过酵母宿主分泌途径的效率的不同。酵母内切蛋白酶Kex2从蛋白前体分子上切除信号肽序列,释放出成熟的分泌蛋白,所以被认为在酵母分泌途径中起到重要的调控作用。本研究工作中,我们发现很多利用Pichia酵母进行分泌表达的外源重组蛋白的最终分泌量极大的受Kex2底物P1’位点氨基酸残基的影响,这也就是说:不同的P1’氨基酸能带来酵母分泌量的很大差异,所以最适P1’氨基酸能够很大程度的提高蛋白分泌的最终总量。不仅如此,向酵母基因组引入冗余的组成型Kex2表达拷贝也能够进一步提高外源蛋白的酵母分泌量,这一事实再次强调了Kex2酶切反应的效率对于Pichia酵母重组分泌蛋白的最终产出的重要性。 |
语种 | 中文 |
学科主题 | 生物化学与分子生物学 |
页码 | 107 |
内容类型 | 学位论文 |
源URL | [http://ir.foo.ac.cn/handle/2SETSVCV/1018] ![]() |
专题 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
作者单位 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 杨松. 通过优化Kex2酶切效率提高Pichia pastoris酵母分泌重组蛋白量的研究[D]. 广州生物院. 中国科学院研究生院. 2013. |
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