| 题名 | 新型流感病毒载体的构建与应用研究 |
| 作者 | 冯立强 |
| 答辩日期 | 2010-05-07 |
| 文献子类 | 博士 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 广州生物院 |
| 导师 | 陈凌 |
| 关键词 | 流感病毒 终止子 活病毒载体 血清/药物筛选 活体成像 |
| 学位名称 | 博士 |
| 学位专业 | 生物技术与医药 |
| 英文摘要 | 流感病毒载体具有高度的安全性与良好的免疫原性，在疫苗开发以及抗流感病毒药物/抗体/血清筛选方面的应用日益受到重视。随着反向遗传学拯救技术的进步，流感病毒载体的构建与改造越来越简便易行。目前已有的流感病毒载体主要有两类：可复制型载体与缺陷型载体，这两类载体均对流感病毒基因组做改动或者改换以容纳外源基因，因而存在感染特性改变、复制生长能力受到削弱或者依赖于特定细胞系等缺陷。本研究优化了本实验室的流感病毒拯救技术，构建了一套高效率的反向遗传学拯救系统，并在此基础上，开发了一套基于NA基因片段的真正意义上的活病毒载体（rPR8 EGFP+NA192opt、rPR8 NA+EGFP、rPR8 NA+Gluci）。这些载体均保留了完整的流感病毒基因组，可以在鸡胚中稳定传代并表达外源基因；外源基因的表达特性与其在NA片段中的位置有关；与野生型病毒相比，rPR8 EGFP+NA192opt病毒生长能力受到显著致弱，而rPR8 NA+EGFP、rPR8 NA+Gluci病毒则仅有轻微致弱。rPR8 EGFP+NA192opt、rPR8 NA+EGFP病毒可以有效感染小鼠DC细胞并表达外源基因，因而可应用于DC疫苗开发；rPR8 NA+EGFP、rPR8 NA+Gluci病毒均可反映抗流感血清的抑制作用，因而可用于抗流感病毒抗体/血清筛选；rPR8 NA+Gluci病毒可以反映抗流感药物金刚烷胺的抑制作用，因而可用于抗流感药物筛选；Gluci报告基因比EGFP及传统的NA酶活性指标更加灵敏；rPR8 NA+Gluci病毒可利用活体成像系统检测其在鸡胚中的复制。本研究为流感病毒载体构建提供了新的思路，为抗流感疫苗及其他疫苗的开发、抗流感药物/抗体/血清筛选提供了新的工具，具有重要的科学意义及应用价值。 |
| 语种 | 中文 |
| 学科主题 | 生物技术与医药 |
| 页码 | 156 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.foo.ac.cn/handle/2SETSVCV/958]  |
| 专题 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 作者单位 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 冯立强. 新型流感病毒载体的构建与应用研究[D]. 广州生物院. 中国科学院研究生院. 2010. |
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