题名 | 蛙虹彩病毒中国株部分分子生物学特性研究 |
作者 | 肖枫 |
学位类别 | 硕士 |
答辩日期 | 2002 |
授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
授予地点 | 中国科学院水生生物研究所 |
导师 | 张奇亚 |
关键词 | 蛙虹彩病毒 免疫印迹 |
学位专业 | 水生生物学 |
中文摘要 | 从我国患流行性疾病的沼泽绿牛蛙(Rana grylio)中分离到的3株病毒RGV(Rana gfylio virus)9506, RGV9807和RGV980,属于蛙虹彩病毒(Ranivirus)。从美国分离到的FV3 (Frog virus 3)是蛙虹彩病毒属的代表株。运用分子生物学和分子免疫学的技术方法,对蛙虹彩病毒不同分离株RGV9506, RGV9807,RGV9808以及FV3的部分分子生物学特性进行了研究。通过虹彩病毒主要衣壳蛋白(Major capsid protein, MCP)基因中已知的保守序列一对特异引物,从RGV9506, RGV9807, RGV9808和FV3中各扩增出一个大小均为531bp的基因片段。对所扩增出的基因片段测序并进行比较,显示出很高的同源性,而由各基因片段所推导的氨基酸序列同源性超过97%.利用酶切对3株RGV的基因组进行限制性长度多态性(Restriction fragment佩engthpolymorphism, RFLP)分析,显示它们的基因组结构有一定差异。RGV9506基因组经限制性内切酶Hind III, Xba I, K.pn I和BamH I分别酶切后,各自得到8, 16, 19和24个片段。克隆了Xba I的4个片段J, L, Q和P,并测定了它们的核普酸序列,大小分别为4032bp,3495bp,1737bp和1011bp,软件分析推测这4个片段各自含有3, 3, 1, 1个开放阅读框。在制备了兔抗RGV9807抗体的基础上,通过ELISA, SDS一PAGE和免疫印迹方法比较3株RGV和FV3之间的免疫原性。结果表明兔抗RGV9807抗体至少能识别3株RGv中6条相同的结构多肤(78,59,49,44,34和16kD )和Fv3中的5条结构多肤(98,78,49,44和1&D)。 |
语种 | 中文 |
公开日期 | 2010-11-16 |
页码 | 53 |
内容类型 | 学位论文 |
源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12626] ![]() |
专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出(2009年前)_学位论文 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 肖枫. 蛙虹彩病毒中国株部分分子生物学特性研究[D]. 中国科学院水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2002. |
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