蓝细菌生理与代谢工程新策略研究
栾国栋
2016-05-18
学科主题微生物代谢工程
关键词蓝细菌 代谢工程 生物乙醇 糖原 光合作用
文献子类专题报告
英文摘要蓝细菌是重要的光合自养微生物,能够利用二氧化碳和太阳能合成有机物并释放氧气,也是最具潜力的生物燃料和生物基化学品光合平台,通过修饰蓝细菌天然代谢途径或向蓝细菌中引入人工构建的代谢途径已经实现了多种化合物的光合合成。乙醇是最具产业化潜力的生物燃料产品,也是最早报道、最具代表性的蓝细菌光合生物基化合物,以乙醇光合为模式进行蓝细菌生理和代谢工程策略的研究具有重要的示范意义。本研究从代谢途径和光合平台两个角度分别开展,探索开发新的优化策略和设计原则。 针对蓝细菌光合细胞工厂中乙醇合成的核心代谢途径PDCzm-slr1192,我们系统运用了体外重构和代谢工程两种策略对该途径进行深入、全面的动态解析。在代谢途径体外重构的基础上,我们系统评价了催化过程各种组分对反应速率的影响发现PDCzm的含量和活性是乙醇合成速率的限制因素,PDCzm和slr1192的最优浓度比为4:6,提高NADPH和丙酮酸的供应也应该是优化乙醇合成速率的重要方向。对体外重构和定量分析的结果,我们通过对蓝细菌的代谢工程改造加以验证。该部分研究为蓝细菌乙醇光合细胞工厂的下一阶段改造明确了方向,也为代谢途径的解析与优化提供了新的研究模式。 针对蓝细菌光合平台本身的生理和代谢特性与机制,我们主要进行糖原代谢系统进行改造和分析。与传统的阻断糖原合成的策略不同,我们采取过量表达糖原磷酸化酶来加速糖原降解的策略。结果我们发现糖原降解速率的加快,不但没有降低胞内糖原含量,反而使之大幅度提高,其原因是糖原磷酸化降解过程的加速降低了胞内磷酸的含量,别构激活了糖原合成的关键酶GlgC,从而使糖原合成得到加强,提高了糖原积累。在乙醇光合的蓝细菌工程藻株中,糖原磷酸化酶的过量表达也提高了糖原的积累,但同时乙醇产量和碳流分配比也得到提高;在限氮条件下,乙醇产量相对野生型藻株提高50%,证明糖原积累与代谢产物合成并非简单的碳流竞争关系。 我们的结果为蓝细菌生理与代谢工程研究提供了新的策略,为蓝细菌生理和代谢功能与调控机制研究提供了新的认识,将有助于开发更高效的蓝细菌光合平台。
内容类型研究报告
源URL[http://ir.qibebt.ac.cn/handle/337004/9802]  
专题青岛生物能源与过程研究所_微生物代谢工程团队
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GB/T 7714
栾国栋. 蓝细菌生理与代谢工程新策略研究. 2016.
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