引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库

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	引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库
	杨浩; 杨青平; 查成喜; 韩跃武
刊名	基础医学与临床
	2012-01-05
期号	1 页码:56-60
关键词	易错PCR DNA-shuffling 单链抗体库
英文摘要	目的引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建高库容量的单链抗体库。方法收集不同年龄、性别、健康状态的人的静脉血各5 mL,提取单个核细胞总RNA,反转录为cDNA,PCR扩增VH和VL基因,应用易错PCR对VH和VL基因进行突变,同时用DNA-shuffling技术对全长单链抗体基因进行体外改组,获得的分子与T载体连接,转化E.coli DH5α,选取阳性克隆,经菌落PCR后酶切鉴定抗体库多样性,计算分析单链抗体库容量。结果成功构建了库容量为4.37×1013的单链抗体库,经酶切鉴定,初步判定抗体库多样性良好。结论引入易错PCR和DNA-shuf-fling技术,成功构建了单链抗体库...
语种	中文
CSCD记录号	CSCD:4467388
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.lzu.edu.cn/handle/262010/163648]
专题	基础医学院_期刊论文
推荐引用方式 GB/T 7714	杨浩,杨青平,查成喜,等. 引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库[J]. 基础医学与临床,2012(1):56-60.
APA	杨浩,杨青平,查成喜,&韩跃武.(2012).引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库.基础医学与临床(1),56-60.
MLA	杨浩,et al."引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库".基础医学与临床 .1(2012):56-60.