稻纵卷叶螟氨肽酶N 基因的克隆及时空表达分析

CORC > 中国农业科学院 > 植物保护研究所 > 功能基因组学与基因安全研究室

	稻纵卷叶螟氨肽酶N 基因的克隆及时空表达分析
	杜立啸; 周艳聪; 王兴云; 韩兰芝; 侯茂林; 彭于发
刊名	应用昆虫学报
	2014
卷号	51 期号:3 页码:689-701
关键词	稻纵卷叶螟 Bt 受体蛋白氨肽酶N 基因克隆时空表达
ISSN号	2095-1353
其他题名	Cloning and spatio-temporal expression of aminopeptidase N encoding genes in Cnaphalocrocis medinalis (Lepidoptera: Pyralidae)
英文摘要	[目的] 昆虫中肠氨肽酶N(Aminopeptidase N,APN)是Bt杀虫蛋白的重要受体之一,与Bt蛋白的杀虫机制及昆虫对Bt蛋白的抗性密切相关。为阐明稻纵卷叶螟 Cnaphalocrocis medinalis(Guenee)APN基因的功能及明确Bt蛋白对稻纵卷叶螟的毒力机制,本研究系统开展了稻纵卷叶螟中肠APN基因的克隆及时空表达分析。[方法] 通过简并引物 PCR结合 RACE技术克隆并获得4条稻纵卷叶螟 APN基因的 cDNA序列全长,采用实时定量PCR技术研究了APN基因在稻纵卷叶螟不同虫态及幼虫不同组织中的时空表达情况。[结果] 经NCBI同源比对分析,认为这4个基因分属于APN基因家族的不同类别,分别将其命名为CmAPN1(GenBank登录号:HQ853294)、CmAPN2(GenBank登录号:HQ853295)、CmAPN3(GenBank登录号:KJ143755)、CmAPN4(GenBank登录号:HQ853296)。序列分析表明,CmAPN1-4 cDNA序列全长分别为:3 698、3 478、3 150和3 149 bp,开放阅读框分别为:3045、2 877、3045和2 862 bp,分别编码965、958、1014和952个氨基酸。其推导的氨基酸序列具有鳞翅目昆虫氨肽酶N的典型结构特征,即含有糖基化位点、N-末端信号肽序列、谷氨酸锌化氨肽酶保守结构GAMEN、锌结合位点 HEX_2HX_(18)E、C-末端糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚信号肽。实时定量研究表明,CmAPNs在幼虫中的表达量显著高于卵、蛹和成虫;在幼虫中,CmAPN1的表达水平明显低于CmAPN2-4,且其在不同龄期中的表达差异显著;CmAPN2-4的表达量随幼虫龄期的增加而增加;CmAPNs在幼虫肠道组织中的表达量显著高于其它组织器官,且CmAPN1和CmAPN2分别在中肠和后肠中呈现高水平表达,CmAPN3在前、中肠内均高水平表达;但CmAPN4在各个组织器官中的表达均保持较低水平。[结论] CmAPNs基因在稻纵卷叶螟的不同虫态和不同组织中呈现了差异显著的时空表达,采用RNA干扰方法进行CmAPNs基因功能研究时,要选择适宜的虫态和虫龄进行干扰。
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/135267]
专题	植物保护研究所_功能基因组学与基因安全研究室
作者单位	中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100193
推荐引用方式 GB/T 7714	杜立啸,周艳聪,王兴云,等. 稻纵卷叶螟氨肽酶N 基因的克隆及时空表达分析[J]. 应用昆虫学报,2014,51(3):689-701.
APA	杜立啸,周艳聪,王兴云,韩兰芝,侯茂林,&彭于发.(2014).稻纵卷叶螟氨肽酶N 基因的克隆及时空表达分析.应用昆虫学报,51(3),689-701.
MLA	杜立啸,et al."稻纵卷叶螟氨肽酶N 基因的克隆及时空表达分析".应用昆虫学报 51.3(2014):689-701.