凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定; Expression and Characterization of Fusion Protein tTF/SA as a Universal Effector for Targeting Blood Coagulati | |
王臻 ; 颜江华 ; 王阶平 ; 谢莲英 ; 吴娜 | |
2007-03 | |
关键词 | 截短组织因子 链霉亲和素 融合蛋白 血管栓塞 truncated Tissue Factor Streptavidin fusion protein thrombosis |
英文摘要 | 制备凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白,并鉴定其生物学活性。利用PCR技术构建tTF与链霉亲和素SA的融合基因,克隆至表达载体pET22b(+),在E.coliBL21(DE_3)中表达,镍亲和层析柱纯化tTF/SA融合蛋白。凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白中tTF的活性,ELISA鉴定融合蛋白中SA与生物素Biotin结合的活性。获得序列正确的tTF/SA/pET22b(+)重组子,融合基因在E.coliBL21(DE_3)中高效表达。纯化后的融合蛋白具有活化FⅩ、引起血液凝固的能力,且能与生物素结合。融合基因已成功在E.coliBL21(DE_3)中表达,tTF/SA融合蛋白具有TF和SA活性。融合蛋白tTF/SA可作为通用效应因子,与生物素化的肿瘤组织血管特异性载体联用,实现选择性诱发肿瘤组织血管栓塞的多点治疗。 【英文摘要】 To prepare a novel fusion protein (tTF/SA) as a universal effector for targeting therapy of blood coagulation and to analyze its biological activities. The fusion gene tTF/SA was constructed by PCR, then inserted into expression vector pET22 b (+),and expressed inE. coli BL21 (DE_3). The fusion protein was purified using Nickel-affinity chromatography column. The activities of tTF moiety of the fusion protein were analyzed by clotting assay and FX activation assay, and the binding activities of Streptavidin...; 福建省自然科学基金项目(No.C0410004); ;厦门大学科技创新项目(No.XDKJCX20053026).~~ |
语种 | 中文 |
出版者 | 中国科学院微生物所;中国微生物学会 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://dspace.xmu.edu.cn/handle/2288/8520] ![]() |
专题 | 医学院-已发表论文 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 王臻,颜江华,王阶平,等. 凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定, Expression and Characterization of Fusion Protein tTF/SA as a Universal Effector for Targeting Blood Coagulati[J],2007. |
APA | 王臻,颜江华,王阶平,谢莲英,&吴娜.(2007).凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定.. |
MLA | 王臻,et al."凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定".(2007). |
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