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	蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析; Expression and Activity Analysis of Catalytic Domain of PTP1B
	王生育 ; 颜江华 ; 潘阳霖 ; 李学军 ; 陈忠
	2008-04
关键词	PTP1Bc 基因表达 蛋白纯化 活性分析 expression protein purification activity analysis activity analysis
英文摘要	从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。Western blotting结果表明所得的蛋白可与抗PTP1B抗体发生特异性结合;酶活实验证实复性的蛋白具有一定的磷酸酶活性。PTP1Bc基因的构建、表达纯化及活性分析,为进一步的功能研究奠定了基础。 【英文摘要】 The amino acid sequence (1-301aa) coding the human PTP1B catalytic domain (PTP1Bc) was obtained from the GenBank.The PTP1Bc gene was constructed by overlapping PCR,then was inserted into vector pET-22b(+) and expressed efficiently in E.coli BL21(DE3) under optimum condition after IPTG induction.The proteins were expressed mainly as inclusion bodies with the yield of more than 30% of total bacterial proteins.The expressed products were purified through Ni~(2+)-affinity chromatographic column.After purificati...; 厦门市重大疾病攻关研究基金(No．3502220051027);; 卫生部(福建省)卫生教育联合攻关项目(No．Wkj2005-2-019)资助~~
语种	中文
出版者	中国科学院微生物所;中国微生物学会
内容类型	期刊论文
源URL	[http://dspace.xmu.edu.cn/handle/2288/8499]
专题	医学院－已发表论文
推荐引用方式 GB/T 7714	王生育,颜江华,潘阳霖,等. 蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析, Expression and Activity Analysis of Catalytic Domain of PTP1B[J],2008.
APA	王生育,颜江华,潘阳霖,李学军,&陈忠.(2008).蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析..
MLA	王生育,et al."蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析".(2008).

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