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双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌
扈庆华 ; 郑薇薇 ; 石晓路 ; 李庆阁 ; 王冰 ; 庄志雄 ; 刘小立 ; 贺连华 ; 吴平芳
刊名http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZHWS200412022&dbname=CJFQ2004
2004-12-30
关键词霍乱弧菌 副溶血弧菌 改良分子信标 双重实时PCR 同步检测
英文摘要目的建立改良分子信标双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法,应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验。方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,分别设计引物和改良分子信标探针,以10种细菌作对照,建立双重实时PCR改良分子信标检测体系,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测。结果改良分子信标双重实时PCR反应体系DNA灵敏度为102.4~166.6fgμl,菌液灵敏度为32~64CFUml或3~6CFUPCR反应体系,无交叉反应。此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测,9份副溶血弧菌实时PCR阳性,其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性,其余样品都为阴性。从样品处理到检测结果仅需1天时间。结论改良分子信标双重实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。
语种中文
内容类型期刊论文
源URL[http://dspace.xmu.edu.cn/handle/2288/21568]  
专题生命科学-已发表论文
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GB/T 7714
扈庆华,郑薇薇,石晓路,等. 双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌[J]. http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZHWS200412022&dbname=CJFQ2004,2004.
APA 扈庆华.,郑薇薇.,石晓路.,李庆阁.,王冰.,...&吴平芳.(2004).双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌.http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZHWS200412022&dbname=CJFQ2004.
MLA 扈庆华,et al."双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌".http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZHWS200412022&dbname=CJFQ2004 (2004).
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