人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析

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	人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析
	谢明辉 ; 李少伟 ; 沈文通 ; 李仲艺 ; 庄玉娣 ; 莫小兵 ; 顾颖 ; 吴婷 ; 张军 ; 夏宁邵
刊名	http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SHWU200907027&dbname=CJFQ2009
	2009-07-25
关键词	大肠杆菌表达系统人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒免疫原性中和抗体
英文摘要	利用大肠杆菌表达系统可溶性表达人乳头瘤病毒18型(HPV18)L1蛋白,经过纯化和重组装过程获得HPV18病毒样颗粒(VLPs),研究其免疫原性和诱发中和抗体生成的水平。首先,提取HPV18的基因组DNA,通过PCR扩增获得HPV18 L1基因片段,将其插入pTrxFus表达载体,在大肠杆菌中可溶性表达HPV18 L1蛋白;其次,通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和疏水相互作用层析获得高纯度的HPV18 L1蛋白,而后透析去除预先加入的还原剂DTT,使HPV18 L1蛋白自发组装成VLPs;最后,通过动态光散射技术和透射电子显微镜鉴定HPV18 VLPs的大小和形态,利用假病毒细胞中和实验评价HPV18 VLPs在实验动物体内的免疫原性和中和抗体生成水平。结果表明,HPV18L1蛋白可以在大肠杆菌表达系统中以可溶形式表达,经过纯化的HPV18 L1蛋白可以自发组装成为半径约为29.34nm、与HPV病毒外观相似的VLP。该VLPs在小鼠体内的中和抗体半数有效剂量为0.006μg,在兔及山羊体内诱导中和抗体滴度高达107。总之,本研究利用原核表达系统可简便高效地获得具有高度免疫原性的HPV18 VLPs,为HPV18预防性疫苗的开发奠定了基础,具有重要的应用意义。
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://dspace.xmu.edu.cn/handle/2288/21153]
专题	生命科学－已发表论文
推荐引用方式 GB/T 7714	谢明辉,李少伟,沈文通,等. 人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析[J]. http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SHWU200907027&dbname=CJFQ2009,2009.
APA	谢明辉.,李少伟.,沈文通.,李仲艺.,庄玉娣.,...&夏宁邵.(2009).人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析.http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SHWU200907027&dbname=CJFQ2009.
MLA	谢明辉,et al."人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析".http://epub.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SHWU200907027&dbname=CJFQ2009 (2009).