| 一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用; Construction and Application of an Escherichia coli High Effective Expression Vector with an Enhancer | |
| 罗文新 ; 张军 ; 杨海杰 ; 李少伟 ; 谢小燕 ; 逄淑强 ; 李少菁 ; 夏宁邵 | |
| 2000-09 | |
| 关键词 | 表达载体 Ω序列 T7启动子 增强型绿色荧光蛋白 Expression vector Ω sequence T7 promoter enhanced green fluorescent protein |
| 英文摘要 | 【中文摘要】 构建的 pTO T7大肠杆菌高效融合表达载体 ,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联 ;多克隆位点 (MCS)包括 8个常用酶切位点 ;可进行融合表达或者非融合表达 ,根据不同的需要加以选择 ;融合蛋白N端为T7g10的 12个起始氨基酸 ,C端为His标签 ;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因克隆至 pTO T7载体 ,在E .coli中的表达结果表明 ,融合EGFP达到菌体总蛋白量的 5 0 %以上 ,90 %以上的融合蛋白以可溶性形式存在 ,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的 pT T7载体的表达产量的比较研究结果表明 ,Ω序列在 pTO T7载体中能显著提高表达效率。 【英文摘要】 In this study,we constructed a high effective fusion expression vector in E.coli . This vector,pTO T7,was characterized as: (1) an enhancer from tobacoo mosaic virus (TMV),Ω sequence,was ligated in front of a T7 promoter in the regulatory sequence; (2) the multicloning sites include eight restriction enzyme sites. It can facilitate fusion or non fusion expression; (3) the N terminal of a fusion protein starts with the first 12 amino acids of T7 gene 10,and the C terminal is the hexahistidine tag; (4) ...; 福建省计委重点攻关课题资助( 96160 ) |
| 语种 | 中文 |
| 出版者 | 《生物工程学报》编辑部 |
| 内容类型 | 期刊论文 |
| 源URL | [http://dspace.xmu.edu.cn/handle/2288/1588]  |
| 专题 | 李少菁 海洋环境－已发表论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 罗文新,张军,杨海杰,等. 一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用, Construction and Application of an Escherichia coli High Effective Expression Vector with an Enhancer[J],2000. |
| APA | 罗文新.,张军.,杨海杰.,李少伟.,谢小燕.,...&夏宁邵.(2000).一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用.. |
| MLA | 罗文新,et al."一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用".(2000). |
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