产肠毒素D金黄色葡萄球菌的筛选及其基因克隆和蛋白表达 | |
甄茵 ; 张仁利 ; 耿艺介 ; 高世同 ; 胡章立 | |
刊名 | http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200801011&dbname=CJFQ2008 |
2012-04-27 ; 2012-04-27 | |
关键词 | 金黄色葡萄球菌肠毒素D 重组SED蛋白 |
中文摘要 | 目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素D基因(entD),表达和纯化其重组蛋白(rSED),以进一步制备抗rSED抗体,研制SED金标免疫快速检测试纸条。方法利用PCR技术,从野生型金黄色葡萄球菌中筛选产肠毒素D金黄色葡萄球菌标准株,扩增entD基因,克隆至pGEM-T Easy载体,亚克隆至原核表达载体pET28a,重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达蛋白,Ni-NTA亲和层析纯化蛋白,免疫印迹检测抗原活性。结果分离获得1株产肠毒素D金黄色葡葡球菌标准株,成功克隆entD序列,测序表明该基因共684 bp,与其他entD序列(GenBank登陆号:M28521)具有99%的同源性。rSED蛋白在大肠杆菌中得到高效的可溶性表达。免疫印迹结果表明,rSED蛋白能被抗天然SED抗体识别。结论通过基因重组技术制备的重组SED蛋白具有良好的免疫反应性。 |
语种 | 中文 |
其他责任者 | 深圳市疾病预防控制中心 ; 深圳大学生命科学学院 深圳518020 ; 深圳大学生命科学学院 ; 深圳518060 ; 深圳518020 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/1427] |
专题 | 深圳大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 甄茵,张仁利,耿艺介,等. 产肠毒素D金黄色葡萄球菌的筛选及其基因克隆和蛋白表达[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200801011&dbname=CJFQ2008,2012, 2012. |
APA | 甄茵,张仁利,耿艺介,高世同,&胡章立.(2012).产肠毒素D金黄色葡萄球菌的筛选及其基因克隆和蛋白表达.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200801011&dbname=CJFQ2008. |
MLA | 甄茵,et al."产肠毒素D金黄色葡萄球菌的筛选及其基因克隆和蛋白表达".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200801011&dbname=CJFQ2008 (2012). |
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