短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

CORC > 深圳大学

	短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定
	刘晓宇 ; 邬玉兰 ; 刘志刚 ; 孟光 ; 张红云
刊名	http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200707004&dbname=CJFQ2007
	2012-04-27 ; 2012-04-27
关键词	短穗鱼尾葵花粉 profilin 基因表达纯化
中文摘要	目的克隆并表达短穗鱼尾葵花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin)。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆短穗鱼尾葵花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短穗鱼尾葵花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性。结果克隆获得了短穗鱼尾葵花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。该序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.52,相对分子质量约为14200。此序列已被GenBank收录,登陆号为EF173600。重组短穗鱼尾葵花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达,进一步经Ni2+亲和层析柱纯化后经Western-blot检测具有良好的免疫学活性。结论成功地克隆和表达了短穗鱼尾葵花粉profilin,为短穗鱼尾葵花粉过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。
语种	中文
其他责任者	深圳大学过敏反应与免疫学研究所 ; 海南省海口市人民医院耳鼻咽喉科 ; 深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳518060 ; 深圳518060 ; 海口570208
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/1053]
专题	深圳大学
推荐引用方式 GB/T 7714	刘晓宇,邬玉兰,刘志刚,等. 短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200707004&dbname=CJFQ2007,2012, 2012.
APA	刘晓宇,邬玉兰,刘志刚,孟光,&张红云.(2012).短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200707004&dbname=CJFQ2007.
MLA	刘晓宇,et al."短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=RDYZ200707004&dbname=CJFQ2007 (2012).