粉尘螨I类变应原基因的多态性分析及表达蛋白的特性鉴定

CORC > 深圳大学

	粉尘螨I类变应原基因的多态性分析及表达蛋白的特性鉴定
	白羽 ; 吉坤美 ; 刘志刚 ; 蔡成郁
刊名	http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZRSZ200702016&dbname=CJFQ2007
	2012-04-27 ; 2012-04-27
关键词	粉尘螨 Derf1 基因多态性原核表达
中文摘要	目的克隆表达我国深圳地区粉尘螨I类变应原Der f 1基因,并进行该基因的多态性分析和鉴定该纯化蛋白的变应原性,为研究具有我国区域特色的粉尘螨变应原奠定基础。方法从深圳地区挑取经形态鉴定的活粉尘螨,提取总RNA,RT-PCR扩增Der f 1基因,克隆到T载体测序确认。通过计算机软件进行该基因的多态性分析。将该目的基因克隆到pET-His表达载体上得到重组质粒pET-Der f 1。工程菌经IPTG诱导培养,表达Der f 1目的蛋白。重组Der f 1蛋白通过6 His-tag蛋白纯化系统进行分离、纯化,并进行Western-Blot检测纯化的Der f 1蛋白与粉尘螨过敏病人血清中IgE的反应性,以鉴定重组Der f 1的变应原性。结果以粉尘螨总RNA为模板,经RT-PCR从深圳地区克隆了4株Der f 1基因。该基因与GenBank公布的Der f 1(No.AB034946.1)比较发现核苷酸的同源性在99.48%-100%之间,理论推导的氨基酸序列同源性在99.69%-100%之间。工程菌经IPTG诱导后高效表达的Der f 1重组蛋白,并主要以包涵体形式存在。Western-Blot试验证实该4株Der f 1基因表达的重组蛋白都具有变应原性。结论本研究克隆了4株深圳地区粉尘螨I类过敏原基因并实现了原核表达,为进一步开展Der f 1蛋白研究和重组变应原免疫治疗疫苗研究奠定基础。
语种	中文
其他责任者	深圳大学生命科学学院 ; 深圳大学生命科学学院深圳518060 ; 深圳518060
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/1043]
专题	深圳大学
推荐引用方式 GB/T 7714	白羽,吉坤美,刘志刚,等. 粉尘螨I类变应原基因的多态性分析及表达蛋白的特性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZRSZ200702016&dbname=CJFQ2007,2012, 2012.
APA	白羽,吉坤美,刘志刚,&蔡成郁.(2012).粉尘螨I类变应原基因的多态性分析及表达蛋白的特性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZRSZ200702016&dbname=CJFQ2007.
MLA	白羽,et al."粉尘螨I类变应原基因的多态性分析及表达蛋白的特性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZRSZ200702016&dbname=CJFQ2007 (2012).