牛奶主要过敏原α_(s1)-酪蛋白全长与片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

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	牛奶主要过敏原α_(s1)-酪蛋白全长与片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定
	曹燕娟 ; 胡东生 ; 刘志刚 ; 陈思 ; 罗新萍 ; 黄钟
刊名	http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZMXZ201007007&dbname=CJFQ2010
	2012-04-27 ; 2012-04-27
关键词	牛奶过敏原 αs1-酪蛋白基因克隆表达
中文摘要	目的:克隆并表达牛奶中主要过敏原αs1-酪蛋白的全长及N端、C端两个片段区基因,用于筛选与制备牛奶主要过敏原的单克隆抗体。方法:利用RT-PCR技术克隆αs1-酪蛋白基因,测序后将目的片段克隆入原核表达质粒pET载体,转化至大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)。经IPTG诱导表达,获得重组αs1-酪蛋白。用Ni2+亲和层析柱纯化,用Western blot和ELISA检测重组蛋白与牛奶过敏患者血清IgE的结合活性。结果:克隆获得αs1-酪蛋白全长的开放阅读框基因为645bp(含终止密码子),编码214个氨基酸。N、C端片段区基因(含终止密码子)分别为285、294bp,编码94、97个氨基酸。三种重组蛋白均能以可溶性表达形式纯化,经Western blot和ELISA检测都具有较好的免疫原性,而αs1-酪蛋白全长的免疫原性更强。结论:成功地克隆和表达了αs1-酪蛋白全长及N、C端两个片段区基因,为研制牛奶主要过敏原的单克隆抗体,制备牛奶主要过敏原的检测试剂奠定了基础。
语种	中文
其他责任者	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室 ; 深圳大学医学院
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/949]
专题	深圳大学
推荐引用方式 GB/T 7714	曹燕娟,胡东生,刘志刚,等. 牛奶主要过敏原α_(s1)-酪蛋白全长与片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZMXZ201007007&dbname=CJFQ2010,2012, 2012.
APA	曹燕娟,胡东生,刘志刚,陈思,罗新萍,&黄钟.(2012).牛奶主要过敏原α_(s1)-酪蛋白全长与片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZMXZ201007007&dbname=CJFQ2010.
MLA	曹燕娟,et al."牛奶主要过敏原α_(s1)-酪蛋白全长与片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZMXZ201007007&dbname=CJFQ2010 (2012).