克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

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	克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定
	易海涛 ; 夏立新 ; 刘芳 ; 闫浩 ; 黄钟 ; 汤慕瑾 ; 陈大玮 ; 刘志刚
刊名	http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=CAPE201103017&dbname=CJFQ2011
	2012-04-27 ; 2012-04-27
关键词	克氏原螯虾原肌球蛋白变应原克隆表达纯化免疫印迹酶联免疫吸附测定
中文摘要	克隆克氏原螯虾主要过敏原原肌球蛋白的一个片段区基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫原性.提取克氏原螯虾总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆得到目的基因;将目的基因连入pMD19-T载体,提质粒酶切鉴定并测序;将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白;利用Western-blotting和ELISA检测该重组蛋白的免疫原性.克隆获得目的基因,其片段长为291 bp,编码97个氨基酸.重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting和ELISA结果表明该蛋白与克氏原螯虾过敏病人混合血清中IgE结合,具有免疫原性.
语种	中文
其他责任者	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/928]
专题	深圳大学
推荐引用方式 GB/T 7714	易海涛,夏立新,刘芳,等. 克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=CAPE201103017&dbname=CJFQ2011,2012, 2012.
APA	易海涛.,夏立新.,刘芳.,闫浩.,黄钟.,...&刘志刚.(2012).克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=CAPE201103017&dbname=CJFQ2011.
MLA	易海涛,et al."克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=CAPE201103017&dbname=CJFQ2011 (2012).