牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的一基因片段的克隆、表达、纯化及抗原性鉴定

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	牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的一基因片段的克隆、表达、纯化及抗原性鉴定
	李建杰 ; 陈大玮 ; 闫浩 ; 杨成彬 ; 邓利 ; 刘杰 ; 刘志刚 ; 黄钟
刊名	http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZSPZ201102006&dbname=CJFQ2011
	2012-04-27 ; 2012-04-27
关键词	牛奶过敏原 β-乳球蛋白抗原性基因鉴定
中文摘要	目的克隆并表达牛奶中主要过敏原β-乳球蛋白(β-LG)的一基因片段,并检测其抗原性。方法利用RT-PCR技术克隆β-LG蛋白基因片段,测序后将目的片段克隆入原核表达质粒pET载体,转化至大肠杆菌origami,经IPTG诱导表达,获得重组β-LG片段蛋白。用Ni2+亲和层析柱纯化,用Western blot和ELISA检测重组蛋白与牛奶过敏患者血清IgE的结合活性。结果克隆获得β-LG片段蛋白,其开放阅读框基因为264 bp(含终止密码子),编码87个氨基酸。获得的重组β-LG片段蛋白既以包涵体形式存在又以可溶性形式存在,用可溶性的蛋白进行纯化,经Western blot和ELISA检测具有较好的抗原性。结论成功地克隆和表达了β-LG的一基因片段,为后续牛奶的免疫原性研究提供参考,也为研制牛奶主要过敏原的单克隆抗体和制备其主要过敏原的检测试剂奠定了基础。
语种	中文
其他责任者	深圳大学过敏反应与免疫学研究所 ; 呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室 ; 深圳大学生命科学院 ; 深圳大学医学院
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/915]
专题	深圳大学
推荐引用方式 GB/T 7714	李建杰,陈大玮,闫浩,等. 牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的一基因片段的克隆、表达、纯化及抗原性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZSPZ201102006&dbname=CJFQ2011,2012, 2012.
APA	李建杰.,陈大玮.,闫浩.,杨成彬.,邓利.,...&黄钟.(2012).牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的一基因片段的克隆、表达、纯化及抗原性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZSPZ201102006&dbname=CJFQ2011.
MLA	李建杰,et al."牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的一基因片段的克隆、表达、纯化及抗原性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZSPZ201102006&dbname=CJFQ2011 (2012).