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	小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定
	星懿展 ; 李泽桂 ; 李红丽 ; 李铁石 ; 丁震宇 ; XING Yi-zhan ; LI Ze-gui ; LI Hong-li ; LI Tie-shi ; DING Zhen-yu
	2010-07-19 ; 2010-07-19
关键词	pBS/U6/STAT3-siRNA STAT3 RNAi 小鼠 pBS/U6/STAT3-siRNA STAT3 RNAi mouse Q78
其他题名	Construction and suppressive effect of siRNA targeting mouse STAT3
中文摘要	目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3siRNA),并通过RT PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3siRNA的抑制效率进行鉴定。结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2334～+2351)位点的质粒干扰效率最高,达70%。结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达。这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具。; Objective To construct the specific interference plasmid targeting mouse STAT3 gene, and identify its suppressive effect. Methods The specific siRNAs targeting STAT3 gene was constructed. The semi-quantificational RT-PCR,Western blotting, immunocytochemical staining, cell proliferation and luciferase assay were used to confirm the validity of the recombinant siRNA plasmid. Results The siRNA plasmid was proved specifically to block the activation of over-expressed STAT3 in a dose-dependent manner in 293T cell, not only at protein level but also at mRNA level. Conclusion RNAi could specifically and efficiently inhibit STAT3 gene expression, and it will become an effective tool for searching the function of STAT3 relating to embryogenesis.; 国家自然科学基金资助项目(30170983); 重庆市人口计划生育委员会第3批科研项目计划资助项目(2004)~~
语种	中文 ; 中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://hdl.handle.net/123456789/75019]
专题	清华大学
推荐引用方式 GB/T 7714	星懿展,李泽桂,李红丽,等. 小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定[J],2010, 2010.
APA	星懿展.,李泽桂.,李红丽.,李铁石.,丁震宇.,...&DING Zhen-yu.(2010).小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定..
MLA	星懿展,et al."小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定".(2010).

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