口虾蛄原肌球蛋白基因表达及变应原性鉴定 | |
詹政科 ; 刘志刚 ; 吉坤美 | |
刊名 | http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZGGW200904016&dbname=CJFQ2009
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2012-04-27 ; 2012-04-27 | |
关键词 | 口虾蛄 变应原 原肌球蛋白 克隆表达 |
中文摘要 | 目的克隆口虾蛄原肌球蛋白(tropomyosin)基因并表达纯化出重组蛋白,研究其变应原性。方法提取口虾蛄总RNA,设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体pET-28a上,转化到E.coliBL21(DE3)后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化。采用免疫印迹(Western-blot)检测其与对虾过敏的患者血清IgE结合活性。结果经序列测定,该基因含有长度为855bp的开放阅读框,编码284个氨基酸(GenBank登录号为EF584510)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测该重组变应原在大肠埃希菌中高效表达36kDa的目的蛋白,且重组变应原具有良好的IgE结合活性。结论本研究成功获得了具有变应原活性的重组口虾蛄原肌球蛋白。 |
语种 | 中文 |
其他责任者 | 深圳大学过敏反应与免疫学研究所 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/973] ![]() |
专题 | 清华大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 詹政科,刘志刚,吉坤美. 口虾蛄原肌球蛋白基因表达及变应原性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZGGW200904016&dbname=CJFQ2009,2012, 2012. |
APA | 詹政科,刘志刚,&吉坤美.(2012).口虾蛄原肌球蛋白基因表达及变应原性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZGGW200904016&dbname=CJFQ2009. |
MLA | 詹政科,et al."口虾蛄原肌球蛋白基因表达及变应原性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=ZGGW200904016&dbname=CJFQ2009 (2012). |
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