大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定 | |
林苏霞 ; 王晓梅 ; 刘志刚 ; 曾梦雅 ; 吴研 ; 陈家杰 | |
刊名 | http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=DDKX201002004&dbname=CJFQ2010
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2012-04-27 ; 2012-04-27 | |
关键词 | 大豆主要过敏原 Gly m Bd 30k 抗原表位区 基因克隆 |
中文摘要 | 根据文献并结合生物信息学方法选取大豆主要过敏原Gly m Bd 30k的抗原表位区,采用PCR方法扩增出该抗原表位区基因片段,并通过酶切连接分别构建单体的pET表达载体(pET-sGly)和二聚体的pET表达载体(pET-dGly),重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析;同时用Ni2+离子亲和层析柱纯化表达的sGly和dGly抗原表位蛋白,用western-blotting和ELISA检测重组蛋白的免疫原性。结果表明:表达的单体sGly蛋白以可溶性表达为主,而其二聚体dGly蛋白以包涵体形式存在,纯化的sGly和dGly蛋白都具有较好的免疫原性,重组蛋白sGly的抗原性更佳。成功构建的大豆主要过敏原Gly m Bd 30k蛋白的抗原表位区单体sGly蛋白及其二聚体dGly蛋白的工程菌,为研制大豆主要过敏原的单克隆抗体以制备用于大豆主要过敏原检测的试剂奠定了基础。 |
语种 | 中文 |
其他责任者 | 呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室 ; 深圳大学生命科学学院 ; 深圳大学医学院 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/944] ![]() |
专题 | 清华大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 林苏霞,王晓梅,刘志刚,等. 大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=DDKX201002004&dbname=CJFQ2010,2012, 2012. |
APA | 林苏霞,王晓梅,刘志刚,曾梦雅,吴研,&陈家杰.(2012).大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=DDKX201002004&dbname=CJFQ2010. |
MLA | 林苏霞,et al."大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=DDKX201002004&dbname=CJFQ2010 (2012). |
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