经合理的序列重组制备花生主要过敏原Ara h 2低致敏衍生物 | |
易海涛 ; 刘芳 ; 夏立新 ; 闫浩 ; 刘飞燕 ; 李建杰 ; 刘志刚 | |
刊名 | http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SWGJ201107011&dbname=CJFQ2011 |
2012-04-27 ; 2012-04-27 | |
关键词 | 花生 重组 过敏原 Ara h 2 低致敏衍生物 疫苗 |
中文摘要 | 目的:构建经序列重组的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其低致敏原性。方法:根据已鉴定的Ara h 2 IgE抗原表位,利用基因工程技术将Ara h 2基因进行合理的组合,并将其序列进行合成,再将合成后的基因连入原核表达载体pET-32a(+)上,然后转入Origami宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白;Western blotting和ELISA鉴定该重组蛋白的低致敏原性。结果:测序结果表明合成后的序列成功转入原核表达载体pET-32a(+)上。重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符。Western blotting和ELISA结果均表明通过基因工程改造的Ara h 2蛋白(S-Ara h 2)与重组的Ara h 2(R-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中IgE显著降低。结论:成功构建了经序列重组的Ara h 2表达载体,该基因表达的重组蛋白具有良好的低致敏原性,这将会为花生过敏患者的脱敏治疗提供了新的安全疫苗基础。 |
语种 | 中文 |
其他责任者 | 深圳大学生命科学学院 ; 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所 ; 新疆华世丹药业股份有限公司 ; 深圳大学医学院 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.calis.edu.cn/hdl/244041/922] |
专题 | 清华大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 易海涛,刘芳,夏立新,等. 经合理的序列重组制备花生主要过敏原Ara h 2低致敏衍生物[J]. http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SWGJ201107011&dbname=CJFQ2011,2012, 2012. |
APA | 易海涛.,刘芳.,夏立新.,闫浩.,刘飞燕.,...&刘志刚.(2012).经合理的序列重组制备花生主要过敏原Ara h 2低致敏衍生物.http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SWGJ201107011&dbname=CJFQ2011. |
MLA | 易海涛,et al."经合理的序列重组制备花生主要过敏原Ara h 2低致敏衍生物".http://epub.edu.cnki.net/grid2008/brief/detailj.aspx?filename=SWGJ201107011&dbname=CJFQ2011 (2012). |
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