Tm-shift 基因分型方法在遗传学中的应用 | |
袁芳1; 徐进1,2; 季林丹1,2; 费丽娟1; 刘盼盼1; 张莉娜[*]1 | |
刊名 | 遗传
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2012 | |
卷号 | 34期号:11页码:1484―1490 |
关键词 | Tm-shift 基因分型 遗传学 |
其他题名 | Application of Tm-shift genotyping method in genetic studies |
通讯作者 | zhanglina@nbu.edu.cn |
合作状况 | 其它 |
中文摘要 | Melting Temperature shift(Tm-shift)是一种新的基因分型方法,主要通过在两条特异性引物5′端加入不同长度的GC序列,PCR扩增后根据熔解曲线中产物Tm值的差异来完成分型。文章建立了Tm-shift法对2 048份样品的29个SNP进行分型,通过分型成功率、重复检测一致率、测序验证准确度综合评价分型效果。结果显示,29个SNP中有27个可以采用本方法分型,分型成功率为93.1%。测序验证准确性达到100%。3种基因型阳性标准对照重复检测一致率为100%;100个随机样品重复检测,重复性为97%。因此,Tm-shift基因分型法是一种成本低廉、准确灵敏、稳定可靠、通量灵活、操作简便的基因分型方法,可在遗传学研究中推广应用。 |
英文摘要 | Melting Temperature shift (Tm-shift) is a new genotyping method. With two GC-rich tails of unequal length combined to 5'-terminal of allele-specific primers, genotypes can be determined by the distinct Tms of the PCR products with inspection of a melting curve on the real-time PCR machine. In this study, 29 SNPs were genotyped with 2 048 sam- ples by using Tm-shift genotyping method, and the results were assessed by success rate, consistent rate, and accuracy. The results indicated that among 29 SNPs, 27 SNPs could be genotyped by Tm-shift. In other words, the success rate was 93.1% The accuracy confirmed by direct sequencing was 100%. The consistency was 100% with 3 control samples, and 97% from a replication study in 100 samples. Thus, Tm-shift is a genotyping method with advantages including low cost, high accu- racy, stability, reliability, flexible throughput, and easy operation, which can be applied to genetic studies widely. |
收录类别 | 其他 |
资助信息 | 浙江省自然科学基金项目(编号:(Y2100857);浙江省教育厅重点科研项目(编号:Z201017918);宁波市自然科学基金项目(编号:2012A610237,2011A610037)资助. |
语种 | 中文 |
公开日期 | 2013-06-18 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://159.226.149.42:8088/handle/152453/7488] ![]() |
专题 | 昆明动物研究所_分子进化基因组学 |
作者单位 | 1.宁波大学医学院,宁波315211 2.中国科学院昆明动物研究所-香港中文大学生物资源与疾病分子机理联合实验室, 昆明650223 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 袁芳,徐进,季林丹,等. Tm-shift 基因分型方法在遗传学中的应用[J]. 遗传,2012,34(11):1484―1490. |
APA | 袁芳,徐进,季林丹,费丽娟,刘盼盼,&张莉娜[*].(2012).Tm-shift 基因分型方法在遗传学中的应用.遗传,34(11),1484―1490. |
MLA | 袁芳,et al."Tm-shift 基因分型方法在遗传学中的应用".遗传 34.11(2012):1484―1490. |
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