博士论文-HPLC/ICP-MS在汞形态分析和蛋白质定量中的应用

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题名	博士论文-HPLC/ICP-MS在汞形态分析和蛋白质定量中的应用
作者	王萌
学位类别	博士
答辩日期	2007
授予单位	中国科学院研究生院
授予地点	北京
导师	赵宇亮 ; 丰伟悦
关键词	HPLC/ICP-MS 汞形态汞结合蛋白同位素稀释蛋白质定量
学位专业	生物无机化学
中文摘要	本论文的主要内容是建立基于高效液相色谱－电感耦合等离子体质谱联用系统（HPLC/ICP-MS）的分析方法，研究低剂量汞暴露大鼠及其子鼠脑中汞的形态，并初步探索HPLC/ICP-MS结合柱后同位素稀释方法在蛋白质定量方面的应用。研究结果如下：; 1．建立了HPLC/ICP-MS分析生物样品中无机汞和甲基汞的方法，此方法对于甲基汞和无机汞的检出限分别可达10 pg和15 pg；; 2．发展了一种新的适合于HPLC/ICP-MS联用系统分析生物体内汞形态的前处理方法，这种前处理方法温和，高效，简便，可以有效地消除ICP-MS测汞时的严重的记忆效应；; 3．建立了HPLC/ICP-MS结合富集稳定同位素示踪法监测前处理过程中汞形态转化的方法，证实了在新建立的前处理方法过程中，汞的形态间的转化率低于4%；; 4．建立了同位素稀释电感耦合等离子质谱测量生物样品中总汞的方法。通过采用同位素稀释法，消除了生物样品的复杂基体对测量结果的影响，而且在稀释剂与样品达到平衡后，待测元素的损失不会影响最终结果，特别适合易挥发的汞元素的测量；; 5．研究了低剂量无机汞暴露的大鼠及其子鼠脏器和脑区中汞和微量元素的分布。发现宫内和哺乳期低剂量无机汞暴露的子鼠脑中也有汞的蓄积，其脑分区中海马和小脑的汞浓度最高，提示无机汞对于脑发育可能也具有潜在的威胁；; 6．利用我们建立的HPLC/ICP-MS方法分析了甲基汞暴露大鼠及其子鼠脑中汞的形态和亚细胞分布。发现母鼠脑中几乎全部为甲基汞，而子鼠脑中有相当数量的无机汞。进入母鼠脑和子鼠脑的甲基汞大多在细胞核中蓄积；分析了甲基汞暴露大鼠及其子鼠脑胞液中的汞结合蛋白，发现一种低分子量的含汞蛋白可能是金属硫蛋白；; 7．首次在四级杆ICP-MS上利用柱后同位素稀释法实现了含硫蛋白质混合物的在线分离和定量分析，为定量蛋白质组学研究提供了一种新的方法。
语种	中文
学科主题	生物无机化学
公开日期	2016-02-25
内容类型	学位论文
源URL	[http://ir.ihep.ac.cn/handle/311005/210589]
专题	多学科研究中心_学位论文和出站报告高能物理研究所_多学科研究中心
作者单位	中国科学院高能物理研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	王萌. 博士论文-HPLC/ICP-MS在汞形态分析和蛋白质定量中的应用[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2007.